河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
5期
152-157
,共6页
王兴涛%罗俊%滕蔓%樊剑鸣%鄂巍%禹斌%刘力%张改平
王興濤%囉俊%滕蔓%樊劍鳴%鄂巍%禹斌%劉力%張改平
왕흥도%라준%등만%번검명%악외%우빈%류력%장개평
流行性乙型脑炎病毒%分离鉴定%M基因%E基因%系统进化树%基因Ⅲ型
流行性乙型腦炎病毒%分離鑒定%M基因%E基因%繫統進化樹%基因Ⅲ型
류행성을형뇌염병독%분리감정%M기인%E기인%계통진화수%기인Ⅲ형
利用RT-PCR技术对河南省某规模化猪场乙脑疑似病例的种猪精液进行分析,从部分样本中扩增出与流行性乙型脑炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的预期产物.在3日龄乳鼠脑内接种种猪精液上清,10 d左右即出现典型神经症状,并且病死鼠脑组织RT-PCR结果均为阳性.用病死鼠脑组织研磨上清接种BHK-21细胞,感染60 h后用JEV单抗进行间接免疫荧光鉴定均为阳性,这表明分离毒株均为JEV流行毒株,分别命名为BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3.对新分离毒株进行体外细胞培养,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3连续传代3次后病毒量均获得明显增加,最高分别可达104.5±0.1TCI50/mL和104.2±0.2TCID50/mL.用生物学软件MEGA 4.0分别构建JEV基因的系统进化树,发现BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3处于同一进化分支,均属于基因Ⅲ型.
利用RT-PCR技術對河南省某規模化豬場乙腦疑似病例的種豬精液進行分析,從部分樣本中擴增齣與流行性乙型腦炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的預期產物.在3日齡乳鼠腦內接種種豬精液上清,10 d左右即齣現典型神經癥狀,併且病死鼠腦組織RT-PCR結果均為暘性.用病死鼠腦組織研磨上清接種BHK-21細胞,感染60 h後用JEV單抗進行間接免疫熒光鑒定均為暘性,這錶明分離毒株均為JEV流行毒株,分彆命名為BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3.對新分離毒株進行體外細胞培養,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3連續傳代3次後病毒量均穫得明顯增加,最高分彆可達104.5±0.1TCI50/mL和104.2±0.2TCID50/mL.用生物學軟件MEGA 4.0分彆構建JEV基因的繫統進化樹,髮現BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3處于同一進化分支,均屬于基因Ⅲ型.
이용RT-PCR기술대하남성모규모화저장을뇌의사병례적충저정액진행분석,종부분양본중확증출여류행성을형뇌염병독(JEV)M기인화E기인구유고도동원성적예기산물.재3일령유서뇌내접충충저정액상청,10 d좌우즉출현전형신경증상,병차병사서뇌조직RT-PCR결과균위양성.용병사서뇌조직연마상청접충BHK-21세포,감염60 h후용JEV단항진행간접면역형광감정균위양성,저표명분리독주균위JEV류행독주,분별명명위BSF.ZZ-1화BSF.ZZ-3.대신분리독주진행체외세포배양,BSF.ZZ-1화BSF.ZZ-3련속전대3차후병독량균획득명현증가,최고분별가체104.5±0.1TCI50/mL화104.2±0.2TCID50/mL.용생물학연건MEGA 4.0분별구건JEV기인적계통진화수,발현BSF.ZZ-1화BSF.ZZ-3처우동일진화분지,균속우기인Ⅲ형.
