蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2011年
5期
825-831
,共7页
叶秋霞%薛仁宇%曹广力%张鹏杰%潘中华%郑小坚%贡成良
葉鞦霞%薛仁宇%曹廣力%張鵬傑%潘中華%鄭小堅%貢成良
협추하%설인우%조엄력%장붕걸%반중화%정소견%공성량
家蚕核型多角体病毒%晚期表达因子基因%双链RNA%转基因家蚕%抗性%经济性状
傢蠶覈型多角體病毒%晚期錶達因子基因%雙鏈RNA%轉基因傢蠶%抗性%經濟性狀
가잠핵형다각체병독%만기표체인자기인%쌍련RNA%전기인가잠%항성%경제성상
为了提高家蚕对核型多角体病毒(BmNPV)的抵抗能力,将带有BmNPV晚期表达因子基因(lef-1)dsRNA表达盒和新霉素抗性基因(neo)表达盒的转基因载体pigA3-LEF-Neo通过精子介导法导入家蚕卵,经G418和GFP双重筛选并结合分子生物学鉴定,证实获得了转基因家蚕.对G6代转基因家蚕2龄幼虫接种BmNPV,结果显示转基因家蚕的死亡率比正常家蚕(对照组)下降了10～ 30个百分点,表明转基因家蚕对BmNPV的抗性有所提高；对接种BmNPV的5龄转基因家蚕A、B系统的定量PCR检测结果显示,2个系统体内的lef-1 mRNA转录水平比对照组平均降低了72倍和26.5倍,最高下降了104倍,进一步表明表达lef-1 dsRNA的转基因家蚕抑制了BmNPVlef-1基因的表达.转基因家蚕的饲养成绩显示其全茧量、茧层量和茧层率等主要经济性状与正常家蚕无明显差异.
為瞭提高傢蠶對覈型多角體病毒(BmNPV)的牴抗能力,將帶有BmNPV晚期錶達因子基因(lef-1)dsRNA錶達盒和新黴素抗性基因(neo)錶達盒的轉基因載體pigA3-LEF-Neo通過精子介導法導入傢蠶卵,經G418和GFP雙重篩選併結閤分子生物學鑒定,證實穫得瞭轉基因傢蠶.對G6代轉基因傢蠶2齡幼蟲接種BmNPV,結果顯示轉基因傢蠶的死亡率比正常傢蠶(對照組)下降瞭10～ 30箇百分點,錶明轉基因傢蠶對BmNPV的抗性有所提高；對接種BmNPV的5齡轉基因傢蠶A、B繫統的定量PCR檢測結果顯示,2箇繫統體內的lef-1 mRNA轉錄水平比對照組平均降低瞭72倍和26.5倍,最高下降瞭104倍,進一步錶明錶達lef-1 dsRNA的轉基因傢蠶抑製瞭BmNPVlef-1基因的錶達.轉基因傢蠶的飼養成績顯示其全繭量、繭層量和繭層率等主要經濟性狀與正常傢蠶無明顯差異.
위료제고가잠대핵형다각체병독(BmNPV)적저항능력,장대유BmNPV만기표체인자기인(lef-1)dsRNA표체합화신매소항성기인(neo)표체합적전기인재체pigA3-LEF-Neo통과정자개도법도입가잠란,경G418화GFP쌍중사선병결합분자생물학감정,증실획득료전기인가잠.대G6대전기인가잠2령유충접충BmNPV,결과현시전기인가잠적사망솔비정상가잠(대조조)하강료10～ 30개백분점,표명전기인가잠대BmNPV적항성유소제고；대접충BmNPV적5령전기인가잠A、B계통적정량PCR검측결과현시,2개계통체내적lef-1 mRNA전록수평비대조조평균강저료72배화26.5배,최고하강료104배,진일보표명표체lef-1 dsRNA적전기인가잠억제료BmNPVlef-1기인적표체.전기인가잠적사양성적현시기전충량、충층량화충층솔등주요경제성상여정상가잠무명현차이.
