北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2012年
3期
469-474
,共6页
高丽%Robert Gyurko%Thomas VanDyke
高麗%Robert Gyurko%Thomas VanDyke
고려%Robert Gyurko%Thomas VanDyke
趋化因子受体1蛋白,人类%牙周炎%腹膜炎%小鼠,转基因
趨化因子受體1蛋白,人類%牙週炎%腹膜炎%小鼠,轉基因
추화인자수체1단백,인류%아주염%복막염%소서,전기인
目的:构建髓细胞选择性表达人类趋化因子受体1(chemokine receptor-like 1,CMKLR1或human chemerin receptor 23,hChemR23)的转基因小鼠,检测其在小鼠腹膜炎和牙周炎的炎症反应中的抑制作用.方法:将全长hChemR23的cDNA和启动子hCD11b克隆到pcDNA3质粒,转基因片段(2.9 kb)经纯化后由波士顿大学转基因/基因敲除小鼠中心构建转基因小鼠.通过实时定量PCR检测亲代hChemR23转基因的拷贝数和mRNA水平.hChemR23转基因雄性小鼠和野生型FVB雌性小鼠杂交繁殖产生杂合型转基因小鼠后代.采用PCR方法检测子代小鼠基因组DNA明确基因型.转基因小鼠经腹腔注射1 mL酵母多糖A溶液(1 g/L)构建急性腹膜炎模型,灌洗细胞经PE标记的抗鼠F4/80和FITC标记的抗鼠Ly6G染色后,采用FACSort方法检测.在小鼠上颌第一磨牙结扎9-0丝线诱导转基因小鼠牙周炎模型,测量釉牙骨质界距牙槽骨骨嵴顶的距离(cementoenamel junction to the alveolar bone crest,CEJ-ABC)检测牙槽骨的丧失.所有实验数据采用配对t检验和方差分析方法进行统计学分析.结果:4个F1亲代小鼠携带hChemR23基因.hChemR23转基因小鼠腹膜炎腹腔灌洗液中中性粒细胞的含量比野生型减少了56%.在丝线结扎诱导的小鼠牙周炎模型中,hChemR23转基因小鼠比野生型小鼠的牙槽骨骨吸收显著降低(P<0.05).结论:hChemR23转基因小鼠过表达hChemR23 mRNA水平,在急性腹膜炎和丝线结扎诱导的牙周炎模型中抑制炎症反应.
目的:構建髓細胞選擇性錶達人類趨化因子受體1(chemokine receptor-like 1,CMKLR1或human chemerin receptor 23,hChemR23)的轉基因小鼠,檢測其在小鼠腹膜炎和牙週炎的炎癥反應中的抑製作用.方法:將全長hChemR23的cDNA和啟動子hCD11b剋隆到pcDNA3質粒,轉基因片段(2.9 kb)經純化後由波士頓大學轉基因/基因敲除小鼠中心構建轉基因小鼠.通過實時定量PCR檢測親代hChemR23轉基因的拷貝數和mRNA水平.hChemR23轉基因雄性小鼠和野生型FVB雌性小鼠雜交繁殖產生雜閤型轉基因小鼠後代.採用PCR方法檢測子代小鼠基因組DNA明確基因型.轉基因小鼠經腹腔註射1 mL酵母多糖A溶液(1 g/L)構建急性腹膜炎模型,灌洗細胞經PE標記的抗鼠F4/80和FITC標記的抗鼠Ly6G染色後,採用FACSort方法檢測.在小鼠上頜第一磨牙結扎9-0絲線誘導轉基因小鼠牙週炎模型,測量釉牙骨質界距牙槽骨骨嵴頂的距離(cementoenamel junction to the alveolar bone crest,CEJ-ABC)檢測牙槽骨的喪失.所有實驗數據採用配對t檢驗和方差分析方法進行統計學分析.結果:4箇F1親代小鼠攜帶hChemR23基因.hChemR23轉基因小鼠腹膜炎腹腔灌洗液中中性粒細胞的含量比野生型減少瞭56%.在絲線結扎誘導的小鼠牙週炎模型中,hChemR23轉基因小鼠比野生型小鼠的牙槽骨骨吸收顯著降低(P<0.05).結論:hChemR23轉基因小鼠過錶達hChemR23 mRNA水平,在急性腹膜炎和絲線結扎誘導的牙週炎模型中抑製炎癥反應.
목적:구건수세포선택성표체인류추화인자수체1(chemokine receptor-like 1,CMKLR1혹human chemerin receptor 23,hChemR23)적전기인소서,검측기재소서복막염화아주염적염증반응중적억제작용.방법:장전장hChemR23적cDNA화계동자hCD11b극륭도pcDNA3질립,전기인편단(2.9 kb)경순화후유파사돈대학전기인/기인고제소서중심구건전기인소서.통과실시정량PCR검측친대hChemR23전기인적고패수화mRNA수평.hChemR23전기인웅성소서화야생형FVB자성소서잡교번식산생잡합형전기인소서후대.채용PCR방법검측자대소서기인조DNA명학기인형.전기인소서경복강주사1 mL효모다당A용액(1 g/L)구건급성복막염모형,관세세포경PE표기적항서F4/80화FITC표기적항서Ly6G염색후,채용FACSort방법검측.재소서상합제일마아결찰9-0사선유도전기인소서아주염모형,측량유아골질계거아조골골척정적거리(cementoenamel junction to the alveolar bone crest,CEJ-ABC)검측아조골적상실.소유실험수거채용배대t검험화방차분석방법진행통계학분석.결과:4개F1친대소서휴대hChemR23기인.hChemR23전기인소서복막염복강관세액중중성립세포적함량비야생형감소료56%.재사선결찰유도적소서아주염모형중,hChemR23전기인소서비야생형소서적아조골골흡수현저강저(P<0.05).결론:hChemR23전기인소서과표체hChemR23 mRNA수평,재급성복막염화사선결찰유도적아주염모형중억제염증반응.