CAJ | 학술논문

目的建立用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠.方法采用受精卵显微注射技术,将含有人ICAM-2启动子、人CD59基因第1个内含子、人CD59cDNA、BGH polyA终止信号的外源基因导入小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卵移植入假孕母鼠的输卵管中待分娩.聚合酶链反应(PCR)及Southern blot确定外源基因整合阳性转基因小鼠.流式细胞术用于外源基因蛋白质水平表达检测.免疫组织化学方法观察人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏等器官表达分布情况.结果产仔130只,9只外源基因整合阳性,整合率6%(9/130).6只获得蛋白质水平表达,蛋白质水平表达强度为人CD59在人白细胞表达强度的80%至95%,转基因效率5%(6/130).免疫组织化学检测显示人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏组织有较强表达,且表达限于血管内皮细胞.结论成功地建立了用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠.
목적건립용우이충이식연구혈관내피세포조직특이성표체인CD59전기인소서.방법채용수정란현미주사기술,장함유인ICAM-2계동자、인CD59기인제1개내함자、인CD59cDNA、BGH polyA종지신호적외원기인도입소서수정란적원핵중,선취주사후잉건강적수정란이식입가잉모서적수란관중대분면.취합매련반응(PCR)급Southern blot학정외원기인정합양성전기인소서.류식세포술용우외원기인단백질수평표체검측.면역조직화학방법관찰인CD59재전기인소서심장、간장、신장등기관표체분포정황.결과산자130지,9지외원기인정합양성,정합솔6%(9/130).6지획득단백질수평표체,단백질수평표체강도위인CD59재인백세포표체강도적80%지95%,전기인효솔5%(6/130).면역조직화학검측현시인CD59재전기인소서심장、간장、신장조직유교강표체,차표체한우혈관내피세포.결론성공지건립료용우이충이식연구혈관내피세포조직특이성표체인CD59전기인소서.