延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE YANBIAN UNIVERSITY
2009年
1期
21-25
,共5页
姬文秀%金东淳%李虎林%鲁艺
姬文秀%金東淳%李虎林%魯藝
희문수%금동순%리호림%로예
大字杜鹃%RAPD%反应体系%优化
大字杜鵑%RAPD%反應體繫%優化
대자두견%RAPD%반응체계%우화
以大字杜鹃为材料,以改进的CTAB法提取大字杜鹃叶片总DNA,分别就模板DNA浓度,引物浓度,DNTP浓度,Taq DNA聚合酶量及镁离子浓度对大字杜鹃RAPD反应结果的影响进行研究.通过对各因子的组合比较,建立了大字杜鹃RAPD反应的优化体系,即总反应体积为25μL,其中包括10 XTaq酶配套缓冲液2.5μL,模板DNA浓度50 mg/L,引物浓度0.5μmol/L,dNTP浓度0.15 mmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,Mg2+浓度2.0 mmol/L,其余用重蒸馏水补足.扩增程序为94℃变性5 min,94℃变性1 min,38℃退火40 s,72℃延伸2min,共41个循环,72℃延伸7 min.
以大字杜鵑為材料,以改進的CTAB法提取大字杜鵑葉片總DNA,分彆就模闆DNA濃度,引物濃度,DNTP濃度,Taq DNA聚閤酶量及鎂離子濃度對大字杜鵑RAPD反應結果的影響進行研究.通過對各因子的組閤比較,建立瞭大字杜鵑RAPD反應的優化體繫,即總反應體積為25μL,其中包括10 XTaq酶配套緩遲液2.5μL,模闆DNA濃度50 mg/L,引物濃度0.5μmol/L,dNTP濃度0.15 mmol/L,Taq DNA聚閤酶1 U,Mg2+濃度2.0 mmol/L,其餘用重蒸餾水補足.擴增程序為94℃變性5 min,94℃變性1 min,38℃退火40 s,72℃延伸2min,共41箇循環,72℃延伸7 min.
이대자두견위재료,이개진적CTAB법제취대자두견협편총DNA,분별취모판DNA농도,인물농도,DNTP농도,Taq DNA취합매량급미리자농도대대자두견RAPD반응결과적영향진행연구.통과대각인자적조합비교,건립료대자두견RAPD반응적우화체계,즉총반응체적위25μL,기중포괄10 XTaq매배투완충액2.5μL,모판DNA농도50 mg/L,인물농도0.5μmol/L,dNTP농도0.15 mmol/L,Taq DNA취합매1 U,Mg2+농도2.0 mmol/L,기여용중증류수보족.확증정서위94℃변성5 min,94℃변성1 min,38℃퇴화40 s,72℃연신2min,공41개순배,72℃연신7 min.
