山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
18期
18-19
,共2页
核基质结合区%基因克隆%逆转录表达载体
覈基質結閤區%基因剋隆%逆轉錄錶達載體
핵기질결합구%기인극륭%역전록표체재체
目的 构建重组人促红素(CHO)细胞核基质结合区MAR的逆转录载体.方法 以CHO细胞DNA为模板,采用PCR扩增CHO细胞的MAR序列,克隆人逆转录表达载体PLXSN-CAT中,经限制性内切酶酶切及DNA序列分析鉴定目的 基因.结果 PCR扩增的特异性片段长度为476 bp,以此构建的重组质粒PLXSN-CAT-MAR经BamH Ⅰ酶切后显示为5.9 kb和476 bp左右的两条片段,测序结果与Gen-bank中的CHO细胞MAR基因(Genbank序列号M62716)序列一致.结论 成功构建了CHO细胞MAR片段PLXSN-CAT-MAR重组逆转录表达载体.
目的 構建重組人促紅素(CHO)細胞覈基質結閤區MAR的逆轉錄載體.方法 以CHO細胞DNA為模闆,採用PCR擴增CHO細胞的MAR序列,剋隆人逆轉錄錶達載體PLXSN-CAT中,經限製性內切酶酶切及DNA序列分析鑒定目的 基因.結果 PCR擴增的特異性片段長度為476 bp,以此構建的重組質粒PLXSN-CAT-MAR經BamH Ⅰ酶切後顯示為5.9 kb和476 bp左右的兩條片段,測序結果與Gen-bank中的CHO細胞MAR基因(Genbank序列號M62716)序列一緻.結論 成功構建瞭CHO細胞MAR片段PLXSN-CAT-MAR重組逆轉錄錶達載體.
목적 구건중조인촉홍소(CHO)세포핵기질결합구MAR적역전록재체.방법 이CHO세포DNA위모판,채용PCR확증CHO세포적MAR서렬,극륭인역전록표체재체PLXSN-CAT중,경한제성내절매매절급DNA서렬분석감정목적 기인.결과 PCR확증적특이성편단장도위476 bp,이차구건적중조질립PLXSN-CAT-MAR경BamH Ⅰ매절후현시위5.9 kb화476 bp좌우적량조편단,측서결과여Gen-bank중적CHO세포MAR기인(Genbank서렬호M62716)서렬일치.결론 성공구건료CHO세포MAR편단PLXSN-CAT-MAR중조역전록표체재체.