高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2009年
9期
1759-1762
,共4页
石渊渊%李志强%谷敬丽%王玉兰
石淵淵%李誌彊%穀敬麗%王玉蘭
석연연%리지강%곡경려%왕옥란
神经鞘磷脂合成酶%薄层层析%神经酰胺%神经鞘磷脂%细胞凋亡
神經鞘燐脂閤成酶%薄層層析%神經酰胺%神經鞘燐脂%細胞凋亡
신경초린지합성매%박층층석%신경선알%신경초린지%세포조망
以HEK293细胞为模型, 利用RNA干扰技术, 将神经鞘磷脂合成酶(SMS)的同工酶(SMS1和SMS2)的siRNA分别联合、转染HEK293细胞. 通过薄层层析法评价SMS酶活性, 同时测神经酰胺(Cer)、卵磷脂(PC)及神经鞘磷脂(SM)的水平, 并以流式细胞仪和Annexin V-FITC、 PI双染法检测细胞凋亡. 结果显示, 与对照组相比, SMS基因沉默后SMS表达水平降低(分别降低17%, 20%, 49%);SM水平显著性降低(P<0.05);Cer水平显著性升高(P<0.05);TNF-α诱导的凋亡显著性升高[分别为58%(P<0.01), 24%(P<0.05), 77%(P<0.01)]. 这些结果提示, SMS基因沉默能降低SM水平并升高Cer水平, 明显增加TNF-α诱导的HEK293细胞凋亡. 由于SM是动脉粥样硬化形成的独立危险因子, 因此本研究有可能为动脉粥样硬化的治疗找到新的靶点和有效途径.
以HEK293細胞為模型, 利用RNA榦擾技術, 將神經鞘燐脂閤成酶(SMS)的同工酶(SMS1和SMS2)的siRNA分彆聯閤、轉染HEK293細胞. 通過薄層層析法評價SMS酶活性, 同時測神經酰胺(Cer)、卵燐脂(PC)及神經鞘燐脂(SM)的水平, 併以流式細胞儀和Annexin V-FITC、 PI雙染法檢測細胞凋亡. 結果顯示, 與對照組相比, SMS基因沉默後SMS錶達水平降低(分彆降低17%, 20%, 49%);SM水平顯著性降低(P<0.05);Cer水平顯著性升高(P<0.05);TNF-α誘導的凋亡顯著性升高[分彆為58%(P<0.01), 24%(P<0.05), 77%(P<0.01)]. 這些結果提示, SMS基因沉默能降低SM水平併升高Cer水平, 明顯增加TNF-α誘導的HEK293細胞凋亡. 由于SM是動脈粥樣硬化形成的獨立危險因子, 因此本研究有可能為動脈粥樣硬化的治療找到新的靶點和有效途徑.
이HEK293세포위모형, 이용RNA간우기술, 장신경초린지합성매(SMS)적동공매(SMS1화SMS2)적siRNA분별연합、전염HEK293세포. 통과박층층석법평개SMS매활성, 동시측신경선알(Cer)、란린지(PC)급신경초린지(SM)적수평, 병이류식세포의화Annexin V-FITC、 PI쌍염법검측세포조망. 결과현시, 여대조조상비, SMS기인침묵후SMS표체수평강저(분별강저17%, 20%, 49%);SM수평현저성강저(P<0.05);Cer수평현저성승고(P<0.05);TNF-α유도적조망현저성승고[분별위58%(P<0.01), 24%(P<0.05), 77%(P<0.01)]. 저사결과제시, SMS기인침묵능강저SM수평병승고Cer수평, 명현증가TNF-α유도적HEK293세포조망. 유우SM시동맥죽양경화형성적독립위험인자, 인차본연구유가능위동맥죽양경화적치료조도신적파점화유효도경.
