湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2012年
12期
2593-2595
,共3页
西尼罗河病毒%E蛋白结构域Ⅲ%原核表达
西尼囉河病毒%E蛋白結構域Ⅲ%原覈錶達
서니라하병독%E단백결구역Ⅲ%원핵표체
根据已发表的西尼罗河病毒(WNV)的DNA序列设计合成一对特异性引物,用聚合酶链式反应(PCR)扩增E蛋白结构域Ⅲ(E-DⅢ)的基因.将PCR产物克隆至pET28a原核表达载体上,获得重组表达质粒pET28a-E-DⅢ.将该质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导后提取包涵体,纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE和Western blot方法证实E-DⅢ的基因可以在大肠杆菌中高效表达.
根據已髮錶的西尼囉河病毒(WNV)的DNA序列設計閤成一對特異性引物,用聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增E蛋白結構域Ⅲ(E-DⅢ)的基因.將PCR產物剋隆至pET28a原覈錶達載體上,穫得重組錶達質粒pET28a-E-DⅢ.將該質粒轉化BL21(DE3),經IPTG誘導後提取包涵體,純化融閤蛋白,通過SDS-PAGE和Western blot方法證實E-DⅢ的基因可以在大腸桿菌中高效錶達.
근거이발표적서니라하병독(WNV)적DNA서렬설계합성일대특이성인물,용취합매련식반응(PCR)확증E단백결구역Ⅲ(E-DⅢ)적기인.장PCR산물극륭지pET28a원핵표체재체상,획득중조표체질립pET28a-E-DⅢ.장해질립전화BL21(DE3),경IPTG유도후제취포함체,순화융합단백,통과SDS-PAGE화Western blot방법증실E-DⅢ적기인가이재대장간균중고효표체.
