CAJ | 학술논문

将磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D2基因及其功能缺陷点突变基因(K758B)从真核表达载体pCGN中克隆至带有绿色荧光标记蛋白的穿梭质粒pAdTrack-CMV中;再与腺病毒骨架载体一起在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,成功构建磷脂酶D2重组腺病毒.该病毒颗粒感染人胚肾293细胞,高效表达磷脂酶D2及其功能缺陷蛋白.这种表达对M3乙酰胆碱受体介导的细胞内磷脂酶D激活无影响.但磷脂酶D2功能缺陷蛋白对蛋白激酶C介导的胞内磷脂酶D激活有显著抑制作用;相反,磷脂酶D2蛋白有显著增强作用.结果表明,磷脂酶D2基因的同源重组腺病毒的表达构建是研究其在细胞内的生理功能的有力工具,细胞内磷脂酶D2激活与蛋白激酶C调控的效应特异性.
장린지선담감전일성린지매D2기인급기공능결함점돌변기인(K758B)종진핵표체재체pCGN중극륭지대유록색형광표기단백적천사질립pAdTrack-CMV중;재여선병독골가재체일기재대장간균BJ5183중진행동원중조,성공구건린지매D2중조선병독.해병독과립감염인배신293세포,고효표체린지매D2급기공능결함단백.저충표체대M3을선담감수체개도적세포내린지매D격활무영향.단린지매D2공능결함단백대단백격매C개도적포내린지매D격활유현저억제작용;상반,린지매D2단백유현저증강작용.결과표명,린지매D2기인적동원중조선병독적표체구건시연구기재세포내적생리공능적유력공구,세포내린지매D2격활여단백격매C조공적효응특이성.