中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2005年
2期
176-179
,共4页
张桦%王希东%石庆华%张强%许健%喻梅辉
張樺%王希東%石慶華%張彊%許健%喻梅輝
장화%왕희동%석경화%장강%허건%유매휘
小花棘豆毒素(OXY)%cDNA克隆%序列分析
小花棘豆毒素(OXY)%cDNA剋隆%序列分析
소화극두독소(OXY)%cDNA극륭%서렬분석
在完成小花棘豆毒素95%氨基酸序列的基础上,根椐已知的氨基酸序列,设计合成了特异简并引物.以小花棘豆总RNA为模板,逆转录合成cDNA第一链,用置换法合成双链cDNA.用特异引物对此双链cDNA进行PCR扩增,将扩增后的目的基因与用SmaⅠ酶切的质粒pUC 18连接,转化大肠杆菌JM107.筛选阳性克隆进行序列分析,获得了OXY基因的全部序列.经测序后测得基因序列与原氨基酸序列对照完全一致.GenBnak数据检索说明,OXY基因编码序列确定是一个从未报道的序列.此研究结果对该毒素的应用研究奠定了基础.
在完成小花棘豆毒素95%氨基痠序列的基礎上,根椐已知的氨基痠序列,設計閤成瞭特異簡併引物.以小花棘豆總RNA為模闆,逆轉錄閤成cDNA第一鏈,用置換法閤成雙鏈cDNA.用特異引物對此雙鏈cDNA進行PCR擴增,將擴增後的目的基因與用SmaⅠ酶切的質粒pUC 18連接,轉化大腸桿菌JM107.篩選暘性剋隆進行序列分析,穫得瞭OXY基因的全部序列.經測序後測得基因序列與原氨基痠序列對照完全一緻.GenBnak數據檢索說明,OXY基因編碼序列確定是一箇從未報道的序列.此研究結果對該毒素的應用研究奠定瞭基礎.
재완성소화극두독소95%안기산서렬적기출상,근거이지적안기산서렬,설계합성료특이간병인물.이소화극두총RNA위모판,역전록합성cDNA제일련,용치환법합성쌍련cDNA.용특이인물대차쌍련cDNA진행PCR확증,장확증후적목적기인여용SmaⅠ매절적질립pUC 18련접,전화대장간균JM107.사선양성극륭진행서렬분석,획득료OXY기인적전부서렬.경측서후측득기인서렬여원안기산서렬대조완전일치.GenBnak수거검색설명,OXY기인편마서렬학정시일개종미보도적서렬.차연구결과대해독소적응용연구전정료기출.
