CAJ | 학술논문

背景:种子细胞来源不足是组织工程研究领域的难题之一,如何充分有效的利用有限的种子细胞,是一个值得深入研究的课题.目的:拟验证脐静脉内皮细胞低密度种植于脱细胞猪动脉支架实现血管内皮化的可行性.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-10/2007-04在潍坊医学院生物化学实验室完成.材料:取新鲜猪颈动脉制备脱血管支架;新鲜脐带由潍坊人民医院产科提供,用于内皮细胞的分离和培养.方法:十二烷基硫酸钠和脱氧胆酸钠联合处理获取脱细胞猪动脉支架.0.1%胶原酶灌注获取脐静脉内皮细胞,光镜和免疫组织化学罄定.分别将细胞以2×105 cm-2低密度和2×106cm-2高密度种植于支架,静态培养11 d.主要观察指标:DAPI染色法连续观察内皮细胞在支架上的生长情况.第11天对支架进行苏木精--伊红染色,扫描电镜观察,ELISA检测2×105 cm-2低密度和2×106 cm-2高密度培养液纤维连接蛋白的表达.结果:脱细胞支架细胞成分完全去除,胞外基质保存完好;细胞呈梭形或多角形,核仁清晰,呈典犁的铺路石样;免疫荧光检测可见细胞胞浆内有颗粒状红色阳性信号.采用DAPI法连续动态观察内皮细胞在支架上生长良好,贴璧较好;苏木精-伊红染色显示支架表面形成连续融合单层细胞:扫描电镜可见内皮细胞单层形成,细胞争多角形,椭圆形.低密度种植的培养液中纤维连接蛋白的表达量较高密度种植的高,分别为(121±7.93)μg/106个细胞和(78.20±3.21)μ g/106个细胞.两者相比,差异有显著性意义(P<0.05).结论:脐静脉内皮细胞低密度种植于脱细胞猪动脉支架不仅可以实现血管内皮化,而且利于增强内皮细胞和细胞外基质黏附力,提高贴壁细胞的抗应切力.
배경:충자세포래원불족시조직공정연구영역적난제지일,여하충분유효적이용유한적충자세포,시일개치득심입연구적과제.목적:의험증제정맥내피세포저밀도충식우탈세포저동맥지가실현혈관내피화적가행성.설계、시간급지점:관찰성실험,우2006-10/2007-04재유방의학원생물화학실험실완성.재료:취신선저경동맥제비탈혈관지가;신선제대유유방인민의원산과제공,용우내피세포적분리화배양.방법:십이완기류산납화탈양담산납연합처리획취탈세포저동맥지가.0.1%효원매관주획취제정맥내피세포,광경화면역조직화학경정.분별장세포이2×105 cm-2저밀도화2×106cm-2고밀도충식우지가,정태배양11 d.주요관찰지표:DAPI염색법련속관찰내피세포재지가상적생장정황.제11천대지가진행소목정--이홍염색,소묘전경관찰,ELISA검측2×105 cm-2저밀도화2×106 cm-2고밀도배양액섬유련접단백적표체.결과:탈세포지가세포성분완전거제,포외기질보존완호;세포정사형혹다각형,핵인청석,정전리적포로석양;면역형광검측가견세포포장내유과립상홍색양성신호.채용DAPI법련속동태관찰내피세포재지가상생장량호,첩벽교호;소목정-이홍염색현시지가표면형성련속융합단층세포:소묘전경가견내피세포단층형성,세포쟁다각형,타원형.저밀도충식적배양액중섬유련접단백적표체량교고밀도충식적고,분별위(121±7.93)μg/106개세포화(78.20±3.21)μ g/106개세포.량자상비,차이유현저성의의(P<0.05).결론:제정맥내피세포저밀도충식우탈세포저동맥지가불부가이실현혈관내피화,이차리우증강내피세포화세포외기질점부력,제고첩벽세포적항응절력.