分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
1期
177-183
,共7页
谢纯政%李万福%刘海燕%李玲%梁炫强
謝純政%李萬福%劉海燕%李玲%樑炫彊
사순정%리만복%류해연%리령%량현강
花生%AhPIP1%克隆%原核表达
花生%AhPIP1%剋隆%原覈錶達
화생%AhPIP1%극륭%원핵표체
本文采用RACE法克隆了花生病程诱导基因(pathogenesis-induced protein gene)全长,命名为AhPIP1,并在GenBank登录,登录号为EU860093.序列分析表明该基因的开放读码框579 bp,编码193个氨基酸.以YY20基因组DNA为模板PCR扩增获得AhPIP1基基因组序列长1 883 bp,包含3个外显子和长度分别为602 bp和600 bp的2个内含子.同源性比较发现AhPIP1与辣椒病程诱导蛋白CaPIP1(ABF72432,AAT35532)相似性达82%.采用Genome Walldng方法获得AhPIP1启动子,序列分析表明该启动子序列长513 bp,包含干旱胁迫、病程胁迫应答元件和生长素、赤霉素应答元件.构建pET32a-AhPIP1原核表达载体,转化表达受体菌Ecoli BL21,原核表达获得大小约40 kD AhPIPl融合蛋白,与推测的AhPIP1基因编码产物的大小一致,表明AhPIP1基因在大肠杆菌中能够表达.
本文採用RACE法剋隆瞭花生病程誘導基因(pathogenesis-induced protein gene)全長,命名為AhPIP1,併在GenBank登錄,登錄號為EU860093.序列分析錶明該基因的開放讀碼框579 bp,編碼193箇氨基痠.以YY20基因組DNA為模闆PCR擴增穫得AhPIP1基基因組序列長1 883 bp,包含3箇外顯子和長度分彆為602 bp和600 bp的2箇內含子.同源性比較髮現AhPIP1與辣椒病程誘導蛋白CaPIP1(ABF72432,AAT35532)相似性達82%.採用Genome Walldng方法穫得AhPIP1啟動子,序列分析錶明該啟動子序列長513 bp,包含榦旱脅迫、病程脅迫應答元件和生長素、赤黴素應答元件.構建pET32a-AhPIP1原覈錶達載體,轉化錶達受體菌Ecoli BL21,原覈錶達穫得大小約40 kD AhPIPl融閤蛋白,與推測的AhPIP1基因編碼產物的大小一緻,錶明AhPIP1基因在大腸桿菌中能夠錶達.
본문채용RACE법극륭료화생병정유도기인(pathogenesis-induced protein gene)전장,명명위AhPIP1,병재GenBank등록,등록호위EU860093.서렬분석표명해기인적개방독마광579 bp,편마193개안기산.이YY20기인조DNA위모판PCR확증획득AhPIP1기기인조서렬장1 883 bp,포함3개외현자화장도분별위602 bp화600 bp적2개내함자.동원성비교발현AhPIP1여랄초병정유도단백CaPIP1(ABF72432,AAT35532)상사성체82%.채용Genome Walldng방법획득AhPIP1계동자,서렬분석표명해계동자서렬장513 bp,포함간한협박、병정협박응답원건화생장소、적매소응답원건.구건pET32a-AhPIP1원핵표체재체,전화표체수체균Ecoli BL21,원핵표체획득대소약40 kD AhPIPl융합단백,여추측적AhPIP1기인편마산물적대소일치,표명AhPIP1기인재대장간균중능구표체.
