宁夏医学杂志
寧夏醫學雜誌
저하의학잡지
NINGXIA MEDICAL JOURNAL
2010年
3期
203-205,封2
,共4页
多聚唾液酸%DNA甲基化%基因外调控%突触
多聚唾液痠%DNA甲基化%基因外調控%突觸
다취타액산%DNA갑기화%기인외조공%돌촉
目的 探讨DNA甲基化是否能够用来作为多聚唾液酸(PSA)表达的基因外调控.方法 用甲基化PCR分析成年小鼠和18d的胚胎鼠(E18)大脑不同区域合成多聚唾液酸的酶的基因- mST8SiaIV(PST)和mST8SiaII(STX)启动子甲基化水平;用dot-blotting分析不同浓度的甲硫胺酸和丙戊酸对PSA表达的影响;用CBRA(Combined bisulfite restriction analysis)进一步确认基因- ST8SiaIV和mST8SiaII启动子甲基化水平,神经细胞和神经胶质的原代培养.结果 (1)胎儿鼠与小鼠的大脑、小脑、基底核和海马,甲基化特异性的PCR结果显示:STX基因转录起始区没有甲基化,PST基因转录起始区在18d的胎儿鼠的所有4个区域和成年鼠的2个区域-大脑和小脑都有甲基化.(2)甲基化特异性的PCR分析原代培养的神经细胞和神经胶质细胞STX基因未发生甲基化,但是在PST基因在神经胶质细胞发现轻微的甲基化.(3)小鼠神经纤维母细胞瘤细胞株-Neuron2A细胞的PST基因启动子几乎完全被甲基化.(4)不同浓度甲硫氨酸处理Neuron2A细胞,PSA表达下降;相反丙戊酸增强了PSA的表达.结论 甲基化能够用来作为多聚唾液酸表达的基因外调控,多聚唾液酸表达的基因外调控可能与突触的形成和记忆的形成有关.
目的 探討DNA甲基化是否能夠用來作為多聚唾液痠(PSA)錶達的基因外調控.方法 用甲基化PCR分析成年小鼠和18d的胚胎鼠(E18)大腦不同區域閤成多聚唾液痠的酶的基因- mST8SiaIV(PST)和mST8SiaII(STX)啟動子甲基化水平;用dot-blotting分析不同濃度的甲硫胺痠和丙戊痠對PSA錶達的影響;用CBRA(Combined bisulfite restriction analysis)進一步確認基因- ST8SiaIV和mST8SiaII啟動子甲基化水平,神經細胞和神經膠質的原代培養.結果 (1)胎兒鼠與小鼠的大腦、小腦、基底覈和海馬,甲基化特異性的PCR結果顯示:STX基因轉錄起始區沒有甲基化,PST基因轉錄起始區在18d的胎兒鼠的所有4箇區域和成年鼠的2箇區域-大腦和小腦都有甲基化.(2)甲基化特異性的PCR分析原代培養的神經細胞和神經膠質細胞STX基因未髮生甲基化,但是在PST基因在神經膠質細胞髮現輕微的甲基化.(3)小鼠神經纖維母細胞瘤細胞株-Neuron2A細胞的PST基因啟動子幾乎完全被甲基化.(4)不同濃度甲硫氨痠處理Neuron2A細胞,PSA錶達下降;相反丙戊痠增彊瞭PSA的錶達.結論 甲基化能夠用來作為多聚唾液痠錶達的基因外調控,多聚唾液痠錶達的基因外調控可能與突觸的形成和記憶的形成有關.
목적 탐토DNA갑기화시부능구용래작위다취타액산(PSA)표체적기인외조공.방법 용갑기화PCR분석성년소서화18d적배태서(E18)대뇌불동구역합성다취타액산적매적기인- mST8SiaIV(PST)화mST8SiaII(STX)계동자갑기화수평;용dot-blotting분석불동농도적갑류알산화병무산대PSA표체적영향;용CBRA(Combined bisulfite restriction analysis)진일보학인기인- ST8SiaIV화mST8SiaII계동자갑기화수평,신경세포화신경효질적원대배양.결과 (1)태인서여소서적대뇌、소뇌、기저핵화해마,갑기화특이성적PCR결과현시:STX기인전록기시구몰유갑기화,PST기인전록기시구재18d적태인서적소유4개구역화성년서적2개구역-대뇌화소뇌도유갑기화.(2)갑기화특이성적PCR분석원대배양적신경세포화신경효질세포STX기인미발생갑기화,단시재PST기인재신경효질세포발현경미적갑기화.(3)소서신경섬유모세포류세포주-Neuron2A세포적PST기인계동자궤호완전피갑기화.(4)불동농도갑류안산처리Neuron2A세포,PSA표체하강;상반병무산증강료PSA적표체.결론 갑기화능구용래작위다취타액산표체적기인외조공,다취타액산표체적기인외조공가능여돌촉적형성화기억적형성유관.
