中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
10期
1339-1343
,共5页
兰爱平%梅卫义%孟金兰%胡芬%杨春涛%杨战利%陈培熹%冯鉴强
蘭愛平%梅衛義%孟金蘭%鬍芬%楊春濤%楊戰利%陳培熹%馮鑒彊
란애평%매위의%맹금란%호분%양춘도%양전리%진배희%풍감강
硫化氢%预处理%氯化钴%p38MAPK%活性氧%线粒体膜电位%凋亡
硫化氫%預處理%氯化鈷%p38MAPK%活性氧%線粒體膜電位%凋亡
류화경%예처리%록화고%p38MAPK%활성양%선립체막전위%조망
目的 探讨硫化氢(H2S)是否通过抑制p38MAPK保护PC12细胞对抗化学性缺氧诱导的损伤.方法 应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hochest 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像检测细胞内的活性氧(ROS);罗丹明123(RH123)染色荧光显微镜照像检测线粒体膜电位(MMP);Western blot法检测p38MAPK蛋白的表达水平.结果 应用600 μmol·L-1 CoCl2处理PC12细胞2 h可使磷酸化(p)p38明显增多;在应用600 μmol·L-1 CoCl2处理PC12细胞前30 min,应用400 μmol·L-1硫氢化钠(NaHS,H2S的供体)预处理细胞不仅可明显的抑制CoCl2诱导的p-p38MAPK表达的增多,还能保护PC12细胞对抗600 μmol·L-1 CoCl2引起的损伤,使细胞存活率升高,凋亡细胞和胞内ROS水平明显降低,MMP丢失减小;在CoCl2损伤PC12细胞前60 min应用p38抑制剂SB302580(20 μmol·L-1)预处理也能产生类似NaHS预处理的细胞保护作用.结论 p38MAPK 介导CoCl2引起PC12细胞的损伤作用;H2S通过抑制p38MAPK的表达及氧化应激反应保护PC12细胞对抗化学性缺氧引起的损伤作用.
目的 探討硫化氫(H2S)是否通過抑製p38MAPK保護PC12細胞對抗化學性缺氧誘導的損傷.方法 應用化學性低氧模擬劑氯化鈷(CoCl2)處理PC12細胞建立化學性缺氧損傷模型.應用CCK-8比色法檢測細胞存活率;Hochest 33258覈染色法觀察細胞凋亡的形態學改變;雙氯熒光素(DCFH-DA)染色熒光顯微鏡照像檢測細胞內的活性氧(ROS);囉丹明123(RH123)染色熒光顯微鏡照像檢測線粒體膜電位(MMP);Western blot法檢測p38MAPK蛋白的錶達水平.結果 應用600 μmol·L-1 CoCl2處理PC12細胞2 h可使燐痠化(p)p38明顯增多;在應用600 μmol·L-1 CoCl2處理PC12細胞前30 min,應用400 μmol·L-1硫氫化鈉(NaHS,H2S的供體)預處理細胞不僅可明顯的抑製CoCl2誘導的p-p38MAPK錶達的增多,還能保護PC12細胞對抗600 μmol·L-1 CoCl2引起的損傷,使細胞存活率升高,凋亡細胞和胞內ROS水平明顯降低,MMP丟失減小;在CoCl2損傷PC12細胞前60 min應用p38抑製劑SB302580(20 μmol·L-1)預處理也能產生類似NaHS預處理的細胞保護作用.結論 p38MAPK 介導CoCl2引起PC12細胞的損傷作用;H2S通過抑製p38MAPK的錶達及氧化應激反應保護PC12細胞對抗化學性缺氧引起的損傷作用.
목적 탐토류화경(H2S)시부통과억제p38MAPK보호PC12세포대항화학성결양유도적손상.방법 응용화학성저양모의제록화고(CoCl2)처리PC12세포건립화학성결양손상모형.응용CCK-8비색법검측세포존활솔;Hochest 33258핵염색법관찰세포조망적형태학개변;쌍록형광소(DCFH-DA)염색형광현미경조상검측세포내적활성양(ROS);라단명123(RH123)염색형광현미경조상검측선립체막전위(MMP);Western blot법검측p38MAPK단백적표체수평.결과 응용600 μmol·L-1 CoCl2처리PC12세포2 h가사린산화(p)p38명현증다;재응용600 μmol·L-1 CoCl2처리PC12세포전30 min,응용400 μmol·L-1류경화납(NaHS,H2S적공체)예처리세포불부가명현적억제CoCl2유도적p-p38MAPK표체적증다,환능보호PC12세포대항600 μmol·L-1 CoCl2인기적손상,사세포존활솔승고,조망세포화포내ROS수평명현강저,MMP주실감소;재CoCl2손상PC12세포전60 min응용p38억제제SB302580(20 μmol·L-1)예처리야능산생유사NaHS예처리적세포보호작용.결론 p38MAPK 개도CoCl2인기PC12세포적손상작용;H2S통과억제p38MAPK적표체급양화응격반응보호PC12세포대항화학성결양인기적손상작용.
