福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2010年
5期
343-346
,共4页
吴佩文%杨立勇%沈喜妹%严孙杰
吳珮文%楊立勇%瀋喜妹%嚴孫傑
오패문%양립용%침희매%엄손걸
受体,G-蛋白偶联%脂肪酸类,非酯化%细胞,培养的%遗传载体%转染%RNA干扰
受體,G-蛋白偶聯%脂肪痠類,非酯化%細胞,培養的%遺傳載體%轉染%RNA榦擾
수체,G-단백우련%지방산류,비지화%세포,배양적%유전재체%전염%RNA간우
目的 构建G蛋白偶联受体40(G protein coupled receptor 40,GPR40)shRNA表达载体质粒,获得干扰质粒稳定转染的小鼠βTC6细胞系.方法 将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入pSilencer4.1-CMV neo表达载体,并测序鉴定.脂质体法把重组质粒转染至βTC6细胞,通过G418筛选建立稳定转染的βTC6细胞系,采用蛋白印迹(Western blotting)技术检测GPR40蛋白表达.结果 构建了GPR40 shRNA重组真核表达载体, 并成功地下调了βTC6细胞的GPR40表达.结论 成功构建了GPR40 shRNA真核表达载体,获得稳定表达GPR40 shRNA的βTC6细胞系.
目的 構建G蛋白偶聯受體40(G protein coupled receptor 40,GPR40)shRNA錶達載體質粒,穫得榦擾質粒穩定轉染的小鼠βTC6細胞繫.方法 將閤成的寡覈苷痠鏈退火形成雙鏈,連接入pSilencer4.1-CMV neo錶達載體,併測序鑒定.脂質體法把重組質粒轉染至βTC6細胞,通過G418篩選建立穩定轉染的βTC6細胞繫,採用蛋白印跡(Western blotting)技術檢測GPR40蛋白錶達.結果 構建瞭GPR40 shRNA重組真覈錶達載體, 併成功地下調瞭βTC6細胞的GPR40錶達.結論 成功構建瞭GPR40 shRNA真覈錶達載體,穫得穩定錶達GPR40 shRNA的βTC6細胞繫.
목적 구건G단백우련수체40(G protein coupled receptor 40,GPR40)shRNA표체재체질립,획득간우질립은정전염적소서βTC6세포계.방법 장합성적과핵감산련퇴화형성쌍련,련접입pSilencer4.1-CMV neo표체재체,병측서감정.지질체법파중조질립전염지βTC6세포,통과G418사선건립은정전염적βTC6세포계,채용단백인적(Western blotting)기술검측GPR40단백표체.결과 구건료GPR40 shRNA중조진핵표체재체, 병성공지하조료βTC6세포적GPR40표체.결론 성공구건료GPR40 shRNA진핵표체재체,획득은정표체GPR40 shRNA적βTC6세포계.
