中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2010年
23期
3516-3519
,共4页
范丽梅%魏敏%杨淑丽%崔松花%崔满华%张丽波
範麗梅%魏敏%楊淑麗%崔鬆花%崔滿華%張麗波
범려매%위민%양숙려%최송화%최만화%장려파
葡萄糖调节蛋白78%人卵巢癌SKOV3细胞%RNA干扰%侵袭
葡萄糖調節蛋白78%人卵巢癌SKOV3細胞%RNA榦擾%侵襲
포도당조절단백78%인란소암SKOV3세포%RNA간우%침습
目的 探讨RNA干涉技术(RNAi)沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因对人卵巢癌SKOV3细胞侵袭力的影响,阐明GRP78基因沉默对SKOV3细胞侵袭力抑制作用的生物学机制.方法 设计并构建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒,脂质体介导转染至SKOV3细胞.RT-PCR和Western印迹法检测GRP78基因表达;RT-PCR检测MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测细胞迁移率.结果 RT-PCR及Western印迹检测转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞GRP78基因表达抑制;RT-PCR结果显示与对照组相比转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达降低;Transwell小室侵袭实验和迁移实验结果显示转染GRP78 siRNA重组质粒SKOV3细胞穿透细胞数(P<0.05)和迁移率均明显降低(P<0.05).结论 ①转染GRP78 siRNA重组质粒有效抑制SKOV3细胞GRP78基因表达;②抑制GRP78基因表达能降低SKOV3细胞的侵袭力和迁移力,有望为抑制卵巢癌转移基因治疗提供新的靶点.
目的 探討RNA榦涉技術(RNAi)沉默葡萄糖調節蛋白78(GRP78)基因對人卵巢癌SKOV3細胞侵襲力的影響,闡明GRP78基因沉默對SKOV3細胞侵襲力抑製作用的生物學機製.方法 設計併構建pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重組質粒,脂質體介導轉染至SKOV3細胞.RT-PCR和Western印跡法檢測GRP78基因錶達;RT-PCR檢測MMP-2、MMP-9 mRNA錶達;Transwell小室侵襲實驗檢測細胞侵襲力;Transwell小室遷移實驗檢測細胞遷移率.結果 RT-PCR及Western印跡檢測轉染GRP78 siRNA重組質粒SKOV3細胞GRP78基因錶達抑製;RT-PCR結果顯示與對照組相比轉染GRP78 siRNA重組質粒SKOV3細胞MMP-2、MMP-9 mRNA錶達降低;Transwell小室侵襲實驗和遷移實驗結果顯示轉染GRP78 siRNA重組質粒SKOV3細胞穿透細胞數(P<0.05)和遷移率均明顯降低(P<0.05).結論 ①轉染GRP78 siRNA重組質粒有效抑製SKOV3細胞GRP78基因錶達;②抑製GRP78基因錶達能降低SKOV3細胞的侵襲力和遷移力,有望為抑製卵巢癌轉移基因治療提供新的靶點.
목적 탐토RNA간섭기술(RNAi)침묵포도당조절단백78(GRP78)기인대인란소암SKOV3세포침습력적영향,천명GRP78기인침묵대SKOV3세포침습력억제작용적생물학궤제.방법 설계병구건pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA중조질립,지질체개도전염지SKOV3세포.RT-PCR화Western인적법검측GRP78기인표체;RT-PCR검측MMP-2、MMP-9 mRNA표체;Transwell소실침습실험검측세포침습력;Transwell소실천이실험검측세포천이솔.결과 RT-PCR급Western인적검측전염GRP78 siRNA중조질립SKOV3세포GRP78기인표체억제;RT-PCR결과현시여대조조상비전염GRP78 siRNA중조질립SKOV3세포MMP-2、MMP-9 mRNA표체강저;Transwell소실침습실험화천이실험결과현시전염GRP78 siRNA중조질립SKOV3세포천투세포수(P<0.05)화천이솔균명현강저(P<0.05).결론 ①전염GRP78 siRNA중조질립유효억제SKOV3세포GRP78기인표체;②억제GRP78기인표체능강저SKOV3세포적침습력화천이력,유망위억제란소암전이기인치료제공신적파점.