丙型肝炎病毒CTL表位基因真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立
병형간염병독CTL표위기인진핵표체재체적구건급은정전염세포계적건립
Construction of eukaryotic expression vector of HCV CTL epitopes and establishment of stable transfected CHO cell line
  • 万方数据
    临床肝胆病杂志 림상간담병잡지
    CHINESE JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
    2011年 1期 45-48 ,共4页

    吕欣%尹文%孙梦宁%黄小军%杨敬%姚敏%薛小平%贾战生%徐志凯

    려흔%윤문%손몽저%황소군%양경%요민%설소평%가전생%서지개

    肝炎病毒属%转染%基因表达%表位,T淋巴细胞%T淋巴细胞,细胞毒性 肝炎病毒屬%轉染%基因錶達%錶位,T淋巴細胞%T淋巴細胞,細胞毒性
    간염병독속%전염%기인표체%표위,T림파세포%T림파세포,세포독성
    目的 构建含丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位基因的真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染细胞系.方法 通过生物信息学预测分析的方法得到涵盖HCV不同基因型与小鼠H2复合体的多个细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,串联后人工合成基因序列,将其克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,然后利用脂质体法转染CHO细胞,通过持续G418筛选建立稳定转染细胞株.最后通过荧光显微镜观察、RT-PCR和Western Blot等方法证实多表位基因的表达.结果 所构建的含有HCV复合多表位基因的真核表达载体pEGFP-mEpi在CHO细胞中能稳定表达.结论 真核表达载体的成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究复合多表位疫苗的基因免疫奠定了基础.
    목적 구건함병형간염병독(HCV)복합다표위기인적진핵표체재체,전염CHO세포,건립은정전염세포계.방법 통과생물신식학예측분석적방법득도함개HCV불동기인형여소서H2복합체적다개세포독성T림파세포(CTL)표위,천련후인공합성기인서렬,장기극륭입진핵표체재체pEGFP-N3중,연후이용지질체법전염CHO세포,통과지속G418사선건립은정전염세포주.최후통과형광현미경관찰、RT-PCR화Western Blot등방법증실다표위기인적표체.결과 소구건적함유HCV복합다표위기인적진핵표체재체pEGFP-mEpi재CHO세포중능은정표체.결론 진핵표체재체적성공구건화은정전염CHO세포계적건립위진일보연구복합다표위역묘적기인면역전정료기출.
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