南昌大学学报（理科版）
南昌大學學報（理科版）
남창대학학보（이과판）
JOURNAL OF NANCHANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2011年
3期
272-278
,共7页
孙晓璐%张平静%汪成富%冯丽萍%樊小英%李忠明
孫曉璐%張平靜%汪成富%馮麗萍%樊小英%李忠明
손효로%장평정%왕성부%풍려평%번소영%리충명
毕赤酵母%原核蛋白抗原%差异性表达
畢赤酵母%原覈蛋白抗原%差異性錶達
필적효모%원핵단백항원%차이성표체
利用毕赤酵母研究真核细胞对不同的原核细菌可溶性蛋白抗原的差异性表达.用PCR技术扩增3种不同的结核杆菌抗原基因Ag85a、ESAT6、以及rdESAT6和1种肺炎链球菌抗原基因PsaA.将它们分别连接到pPic9k载体中,在毕赤酵母中进行表达.然后采用离子交换柱或镍柱(Ni-NTA)分别纯化这4种可溶性蛋白抗原.在这些表达的原核可溶性抗原中,肺炎球菌的PsaA蛋白抗原表达量最高,约200 mg/L;然而,3种结核杆菌抗原的表达量差异性不大,rdESAT6约2 mg/L,Ag85a约1 mg/L,而ESAT6低于0.5 mg/L且不稳定.另外,ESAT6和rdESAT6蛋白分别有不同程度的糖基化现象.在相似的条件下,不同的原核抗原在毕赤酵母系统中的表达在难易程度与产量等方面存在很大的差异姓.
利用畢赤酵母研究真覈細胞對不同的原覈細菌可溶性蛋白抗原的差異性錶達.用PCR技術擴增3種不同的結覈桿菌抗原基因Ag85a、ESAT6、以及rdESAT6和1種肺炎鏈毬菌抗原基因PsaA.將它們分彆連接到pPic9k載體中,在畢赤酵母中進行錶達.然後採用離子交換柱或鎳柱(Ni-NTA)分彆純化這4種可溶性蛋白抗原.在這些錶達的原覈可溶性抗原中,肺炎毬菌的PsaA蛋白抗原錶達量最高,約200 mg/L;然而,3種結覈桿菌抗原的錶達量差異性不大,rdESAT6約2 mg/L,Ag85a約1 mg/L,而ESAT6低于0.5 mg/L且不穩定.另外,ESAT6和rdESAT6蛋白分彆有不同程度的糖基化現象.在相似的條件下,不同的原覈抗原在畢赤酵母繫統中的錶達在難易程度與產量等方麵存在很大的差異姓.
이용필적효모연구진핵세포대불동적원핵세균가용성단백항원적차이성표체.용PCR기술확증3충불동적결핵간균항원기인Ag85a、ESAT6、이급rdESAT6화1충폐염련구균항원기인PsaA.장타문분별련접도pPic9k재체중,재필적효모중진행표체.연후채용리자교환주혹얼주(Ni-NTA)분별순화저4충가용성단백항원.재저사표체적원핵가용성항원중,폐염구균적PsaA단백항원표체량최고,약200 mg/L;연이,3충결핵간균항원적표체량차이성불대,rdESAT6약2 mg/L,Ag85a약1 mg/L,이ESAT6저우0.5 mg/L차불은정.령외,ESAT6화rdESAT6단백분별유불동정도적당기화현상.재상사적조건하,불동적원핵항원재필적효모계통중적표체재난역정도여산량등방면존재흔대적차이성.
