安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2012年
7期
897-901
,共5页
原发性肝癌%奥沙利铂%树突状细胞%Exosome
原髮性肝癌%奧沙利鉑%樹突狀細胞%Exosome
원발성간암%오사리박%수돌상세포%Exosome
目的 观察奥沙利铂(OXA)联合负载HepG2 细胞裂解物的Exosome 诱导的效应性T 细胞对肝癌HepG2 细胞系增殖的抑制作用.方法 自健康人外周血中提取单个核细胞和T 淋巴细胞,并以GM-CSF + IL-4 的培养方案获得树突状细胞(DC).将反复冻融后产生的HepG2 细胞裂解物体外致敏DC,收集培养上清后以超高速离心法分离得到Exosome,电镜下观察其形态特征.用致敏DC 及其分泌的Exosome刺激T 淋巴细胞的增殖和活化.以ELISA 试验检测不同刺激环境下T 细胞分泌IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α 的能力.以细胞杀伤实验(MTT 法)检测不同因素刺激后的T 细胞、OXA(2.5、5.0、10.0 mg·L-1)以及两者联合应用对HepG2 细胞生长的抑制效应.结果 与未致敏DC 及其分泌的Exosome 相比,HepG2 细胞冻融裂解物致敏的DC 及其分泌的Exosome 能显著促进T 细胞的增殖,并使其活化和分泌大量的IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ和TFN-α等Th1 型细胞因子.活化后的T 细胞、OXA 以及两者联合应用对HepG2 细胞体外增殖均有抑制作用,而活化T 细胞联合10 mg·L-1 OXA 对HepG2 细胞的杀伤率最高,但与联合5 mg·L-1 OXA 的效应相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 负载肿瘤细胞抗原的DC 所分泌的Exosome 可在体外刺激T 细胞,使其活化为具有抗肿瘤效应的细胞毒性T 细胞,该细胞联合低浓度OXA 能显著抑制肝癌细胞的体外增殖,并降低OXA 的用量.
目的 觀察奧沙利鉑(OXA)聯閤負載HepG2 細胞裂解物的Exosome 誘導的效應性T 細胞對肝癌HepG2 細胞繫增殖的抑製作用.方法 自健康人外週血中提取單箇覈細胞和T 淋巴細胞,併以GM-CSF + IL-4 的培養方案穫得樹突狀細胞(DC).將反複凍融後產生的HepG2 細胞裂解物體外緻敏DC,收集培養上清後以超高速離心法分離得到Exosome,電鏡下觀察其形態特徵.用緻敏DC 及其分泌的Exosome刺激T 淋巴細胞的增殖和活化.以ELISA 試驗檢測不同刺激環境下T 細胞分泌IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α 的能力.以細胞殺傷實驗(MTT 法)檢測不同因素刺激後的T 細胞、OXA(2.5、5.0、10.0 mg·L-1)以及兩者聯閤應用對HepG2 細胞生長的抑製效應.結果 與未緻敏DC 及其分泌的Exosome 相比,HepG2 細胞凍融裂解物緻敏的DC 及其分泌的Exosome 能顯著促進T 細胞的增殖,併使其活化和分泌大量的IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ和TFN-α等Th1 型細胞因子.活化後的T 細胞、OXA 以及兩者聯閤應用對HepG2 細胞體外增殖均有抑製作用,而活化T 細胞聯閤10 mg·L-1 OXA 對HepG2 細胞的殺傷率最高,但與聯閤5 mg·L-1 OXA 的效應相比,差異無統計學意義(P>0.05).結論 負載腫瘤細胞抗原的DC 所分泌的Exosome 可在體外刺激T 細胞,使其活化為具有抗腫瘤效應的細胞毒性T 細胞,該細胞聯閤低濃度OXA 能顯著抑製肝癌細胞的體外增殖,併降低OXA 的用量.
목적 관찰오사리박(OXA)연합부재HepG2 세포렬해물적Exosome 유도적효응성T 세포대간암HepG2 세포계증식적억제작용.방법 자건강인외주혈중제취단개핵세포화T 림파세포,병이GM-CSF + IL-4 적배양방안획득수돌상세포(DC).장반복동융후산생적HepG2 세포렬해물체외치민DC,수집배양상청후이초고속리심법분리득도Exosome,전경하관찰기형태특정.용치민DC 급기분비적Exosome자격T 림파세포적증식화활화.이ELISA 시험검측불동자격배경하T 세포분비IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ화TNF-α 적능력.이세포살상실험(MTT 법)검측불동인소자격후적T 세포、OXA(2.5、5.0、10.0 mg·L-1)이급량자연합응용대HepG2 세포생장적억제효응.결과 여미치민DC 급기분비적Exosome 상비,HepG2 세포동융렬해물치민적DC 급기분비적Exosome 능현저촉진T 세포적증식,병사기활화화분비대량적IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ화TFN-α등Th1 형세포인자.활화후적T 세포、OXA 이급량자연합응용대HepG2 세포체외증식균유억제작용,이활화T 세포연합10 mg·L-1 OXA 대HepG2 세포적살상솔최고,단여연합5 mg·L-1 OXA 적효응상비,차이무통계학의의(P>0.05).결론 부재종류세포항원적DC 소분비적Exosome 가재체외자격T 세포,사기활화위구유항종류효응적세포독성T 세포,해세포연합저농도OXA 능현저억제간암세포적체외증식,병강저OXA 적용량.