中国临床神经科学
中國臨床神經科學
중국림상신경과학
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL NEUROSCIENCES
2012年
3期
241-246
,共6页
喻哲明%丁正同%任惠民%邬剑军%王坚%陈嬿
喻哲明%丁正同%任惠民%鄔劍軍%王堅%陳嬿
유철명%정정동%임혜민%오검군%왕견%진연
β淀粉样蛋白1-42%α-突触核蛋白聚集%帕金森病%氧自由基
β澱粉樣蛋白1-42%α-突觸覈蛋白聚集%帕金森病%氧自由基
β정분양단백1-42%α-돌촉핵단백취집%파금삼병%양자유기
目的:通过转染人α-突触核蛋白(α-syn)A53T突变基因的PC12细胞(A53T-PC12细胞)模型,探讨β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对A53T-PC12细胞在Ser29位点α-syn磷酸化(Pα-syn)水平、聚集程度的影响.方法:分别予H2O2、PBS、Aβ1-42干预A53T-PC12细胞(将A53T-PC12细胞分为:PBS干预组; 5μmol·L-1 Aβ1-42干预组; 5μmol·L-1 Aβ1-42+300 μmol·L-1维生素C干预组；200μmol·L-1 H2O2干预组),观察细胞内活性氧自由基(ROS)水平变化.并通过双重免疫荧光染色观察A53T-PC12细胞内α-syn聚集情况,并通过Western blot半定量分析A53T-PC12细胞内Ser129位点磷酸化Pα-syn水平.结果:Aβ1-42增加细胞内ROS.免疫荧光染色提示Aβ1-42干预后促进A53T-PC12细胞内α-syn聚集;Western blot半定量分析显示Pα-syn较PBS干预组升高(P＜0.001,P＜0.05).结论:Aβ1-42促进A53T-PC12细胞内α-syn 在Ser129位点磷酸化和聚集.
目的:通過轉染人α-突觸覈蛋白(α-syn)A53T突變基因的PC12細胞(A53T-PC12細胞)模型,探討β-澱粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)對A53T-PC12細胞在Ser29位點α-syn燐痠化(Pα-syn)水平、聚集程度的影響.方法:分彆予H2O2、PBS、Aβ1-42榦預A53T-PC12細胞(將A53T-PC12細胞分為:PBS榦預組; 5μmol·L-1 Aβ1-42榦預組; 5μmol·L-1 Aβ1-42+300 μmol·L-1維生素C榦預組；200μmol·L-1 H2O2榦預組),觀察細胞內活性氧自由基(ROS)水平變化.併通過雙重免疫熒光染色觀察A53T-PC12細胞內α-syn聚集情況,併通過Western blot半定量分析A53T-PC12細胞內Ser129位點燐痠化Pα-syn水平.結果:Aβ1-42增加細胞內ROS.免疫熒光染色提示Aβ1-42榦預後促進A53T-PC12細胞內α-syn聚集;Western blot半定量分析顯示Pα-syn較PBS榦預組升高(P＜0.001,P＜0.05).結論:Aβ1-42促進A53T-PC12細胞內α-syn 在Ser129位點燐痠化和聚集.
목적:통과전염인α-돌촉핵단백(α-syn)A53T돌변기인적PC12세포(A53T-PC12세포)모형,탐토β-정분양단백1-42(Aβ1-42)대A53T-PC12세포재Ser29위점α-syn린산화(Pα-syn)수평、취집정도적영향.방법:분별여H2O2、PBS、Aβ1-42간예A53T-PC12세포(장A53T-PC12세포분위:PBS간예조; 5μmol·L-1 Aβ1-42간예조; 5μmol·L-1 Aβ1-42+300 μmol·L-1유생소C간예조；200μmol·L-1 H2O2간예조),관찰세포내활성양자유기(ROS)수평변화.병통과쌍중면역형광염색관찰A53T-PC12세포내α-syn취집정황,병통과Western blot반정량분석A53T-PC12세포내Ser129위점린산화Pα-syn수평.결과:Aβ1-42증가세포내ROS.면역형광염색제시Aβ1-42간예후촉진A53T-PC12세포내α-syn취집;Western blot반정량분석현시Pα-syn교PBS간예조승고(P＜0.001,P＜0.05).결론:Aβ1-42촉진A53T-PC12세포내α-syn 재Ser129위점린산화화취집.
