两步法从脐血CD34+细胞获得大量树突细胞的初步研究
량보법종제혈CD34+세포획득대량수돌세포적초보연구
Preliminary study on extensive amplification of human dendritic cells differentiated from cord blood CD34+ progenitor cells by two-step culture
  • 万方数据
    中华血液学杂志 중화혈액학잡지
    Chinese Journal of Hematology
    2004年 2期 70-73 ,共4页

    王亚非%李茜%孟恒星%于珍%刘津华%崔雯%周余%麦玉洁%尤胜国%邱录贵

    왕아비%리천%맹항성%우진%류진화%최문%주여%맥옥길%우성국%구록귀

    树突细胞%胎血%造血干细胞%体外扩增%诱导 樹突細胞%胎血%造血榦細胞%體外擴增%誘導
    수돌세포%태혈%조혈간세포%체외확증%유도
    目的探索利用先扩增后诱导的"两步法"从脐血(CB)CD34+细胞高效大量地获得树突细胞(DC).方法免疫磁珠法从CB分选获得CD34+细胞,以干细胞因子(SCF)、IL-3、Flt-3配体(FL)、Tpo组合刺激,扩增7 d、10 d和14 d(依次为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组)后以GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导8 d或5 d获得DC,通过相差显微镜、电镜观察形态,流式细胞仪检测表型,混合淋巴细胞培养、ELISA法检测培养液上清IL-12含量评价其功能.结果CB CD34+细胞经SCF+IL-3+FL+Tpo刺激扩增7 d、10 d和14 d后细胞总数分别扩增了(53.39±20.59)倍、(307.17±119.59)倍和(1117.25±335.49)倍.经GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导8 d后所得CD1a+细胞是扩增前细胞数的(21.40±16.70)倍、(143.20±60.35)倍和(150.80±42.16)倍,Ⅱ、Ⅲ组明显多于Ⅰ组(P＜0.05),但Ⅱ、Ⅲ组间无显著性差异(P＞0.05).所得DC的形态、表型及刺激异基因T细胞增殖能力、IL-12分泌量,三组无显著性差异(P＞0.05).当诱导时间缩短至5 d时,各组DC功能均显著下降(P＜0.05).结论CB CD34+细胞扩增7～10d再诱导8 d可以高效大量获得具有正常功能的DC,而扩增时间超过10 d并不能显著增加DC产量,诱导时间少于8 d将降低所得DC的功能.
    목적탐색이용선확증후유도적"량보법"종제혈(CB)CD34+세포고효대량지획득수돌세포(DC).방법면역자주법종CB분선획득CD34+세포,이간세포인자(SCF)、IL-3、Flt-3배체(FL)、Tpo조합자격,확증7 d、10 d화14 d(의차위Ⅰ、Ⅱ화Ⅲ조)후이GM-CSF+IL-4+TNF-α유도8 d혹5 d획득DC,통과상차현미경、전경관찰형태,류식세포의검측표형,혼합림파세포배양、ELISA법검측배양액상청IL-12함량평개기공능.결과CB CD34+세포경SCF+IL-3+FL+Tpo자격확증7 d、10 d화14 d후세포총수분별확증료(53.39±20.59)배、(307.17±119.59)배화(1117.25±335.49)배.경GM-CSF+IL-4+TNF-α유도8 d후소득CD1a+세포시확증전세포수적(21.40±16.70)배、(143.20±60.35)배화(150.80±42.16)배,Ⅱ、Ⅲ조명현다우Ⅰ조(P＜0.05),단Ⅱ、Ⅲ조간무현저성차이(P＞0.05).소득DC적형태、표형급자격이기인T세포증식능력、IL-12분비량,삼조무현저성차이(P＞0.05).당유도시간축단지5 d시,각조DC공능균현저하강(P＜0.05).결론CB CD34+세포확증7～10d재유도8 d가이고효대량획득구유정상공능적DC,이확증시간초과10 d병불능현저증가DC산량,유도시간소우8 d장강저소득DC적공능.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문