中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2001年
10期
597-600
,共4页
王勇%李戈%饶青%耿以琪%林永敏%宋玉华%吴克复
王勇%李戈%饒青%耿以琪%林永敏%宋玉華%吳剋複
왕용%리과%요청%경이기%림영민%송옥화%오극복
白血病系%白细胞介素-18%序列分析,cDNA%寡核苷酸探针
白血病繫%白細胞介素-18%序列分析,cDNA%寡覈苷痠探針
백혈병계%백세포개소-18%서렬분석,cDNA%과핵감산탐침
目的阐明白细胞介素18(IL-18)在人白血病细胞系J6-1的表达与调控,探讨IL-18 在白血病发生中的意义.方法应用逆转录浆合酶链反应检测IL-18 mRNA的表达,酶切鉴定其特异性;构建IL-18的重组质粒,测序分析其cDNA 序列的同源性;应用反义核酸技术,观察不同浓度的IL-18反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对J6-1细胞增殖的影响. 结果 J6-1细胞组成性高表达IL-18 mRNA,测序结果表明,其cDNA 序列与文献报道IL-18的同源性为99%, 仅有一处同义点突变(35 UCA→UCC).正常人外周血单个核细胞(PBMC)IL-18 mRNA的表达水平很低(0.13±0.05),CpG寡脱氧核苷酸(CpG - ODN)显著上调IL-18在PBMC的表达(0.82±0.24),但对J6-1细胞无类似上调作用.IL-18在J6-1细胞的表达水平(0.98±0.29)明显高于在K562、HL-60、U937和LCL细胞系的表达.IL-18 ASODN能显著抑制J6-1细胞的增殖(抑制率43.3%),而对HL-60的抑制作用不明显(抑制率16.7%). 结论 J6-1细胞组成性高表达IL-18;IL-18基因的编码区在J6-1细胞不存在有意义的突变;IL-18可能通过自分泌途径正向调节J6-1细胞的增殖.
目的闡明白細胞介素18(IL-18)在人白血病細胞繫J6-1的錶達與調控,探討IL-18 在白血病髮生中的意義.方法應用逆轉錄漿閤酶鏈反應檢測IL-18 mRNA的錶達,酶切鑒定其特異性;構建IL-18的重組質粒,測序分析其cDNA 序列的同源性;應用反義覈痠技術,觀察不同濃度的IL-18反義寡脫氧覈苷痠(ASODN)對J6-1細胞增殖的影響. 結果 J6-1細胞組成性高錶達IL-18 mRNA,測序結果錶明,其cDNA 序列與文獻報道IL-18的同源性為99%, 僅有一處同義點突變(35 UCA→UCC).正常人外週血單箇覈細胞(PBMC)IL-18 mRNA的錶達水平很低(0.13±0.05),CpG寡脫氧覈苷痠(CpG - ODN)顯著上調IL-18在PBMC的錶達(0.82±0.24),但對J6-1細胞無類似上調作用.IL-18在J6-1細胞的錶達水平(0.98±0.29)明顯高于在K562、HL-60、U937和LCL細胞繫的錶達.IL-18 ASODN能顯著抑製J6-1細胞的增殖(抑製率43.3%),而對HL-60的抑製作用不明顯(抑製率16.7%). 結論 J6-1細胞組成性高錶達IL-18;IL-18基因的編碼區在J6-1細胞不存在有意義的突變;IL-18可能通過自分泌途徑正嚮調節J6-1細胞的增殖.
목적천명백세포개소18(IL-18)재인백혈병세포계J6-1적표체여조공,탐토IL-18 재백혈병발생중적의의.방법응용역전록장합매련반응검측IL-18 mRNA적표체,매절감정기특이성;구건IL-18적중조질립,측서분석기cDNA 서렬적동원성;응용반의핵산기술,관찰불동농도적IL-18반의과탈양핵감산(ASODN)대J6-1세포증식적영향. 결과 J6-1세포조성성고표체IL-18 mRNA,측서결과표명,기cDNA 서렬여문헌보도IL-18적동원성위99%, 부유일처동의점돌변(35 UCA→UCC).정상인외주혈단개핵세포(PBMC)IL-18 mRNA적표체수평흔저(0.13±0.05),CpG과탈양핵감산(CpG - ODN)현저상조IL-18재PBMC적표체(0.82±0.24),단대J6-1세포무유사상조작용.IL-18재J6-1세포적표체수평(0.98±0.29)명현고우재K562、HL-60、U937화LCL세포계적표체.IL-18 ASODN능현저억제J6-1세포적증식(억제솔43.3%),이대HL-60적억제작용불명현(억제솔16.7%). 결론 J6-1세포조성성고표체IL-18;IL-18기인적편마구재J6-1세포불존재유의의적돌변;IL-18가능통과자분비도경정향조절J6-1세포적증식.
