CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨真核翻译延长因子1A1(eEF1A1)表达沉默对人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株Jurkat增殖、凋亡的影响及其作用机制.应用实时PCR法和Western blot法分别别检测Jurkat细胞和3例健康成人外周血单个核细胞(PBMNC)中eEF1A1 mRNA和蛋白的表达.构建eEF1A1-shRNA慢病毒并感染Jurkat细胞,另设空白和阴性对照组,应用实时PCR法和Western blot法分别检测细胞eEF1A1 mRNA和蛋白的表达；应用MTT法、Annexin V-APC标记法、DNA倍体法分别检测细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期,Western blot法检测细胞PI3K/Akt信号通路相关信号分子的表达.结果表明,Jurkat细胞eEF1A1 mRNA和蛋白的表达水平明显高于健康成人PBMNC中的表达(P＜0.01,P＜0.05)；构建的eEF1A1-shRNA慢病毒高效沉默Jurkat细胞eEF1A1的表达.与阴性对照组相比,eEF1A1-shRNA组Jurkat细胞增殖能力明显下降,凋亡明显增多,细胞周期被阻滞于G0/G1期,p-Akt、NF-κB、p-NF-κB、mTOR、p-mTOR蛋白的表达明显下调.结论:eEF1A1在T-ALL细胞中可能具有潜在的致癌作用,其表达沉默可有效抑制Jurkat细胞的增殖并诱导凋亡,其机制可能与下调PI3K/Akt/NF-κB和PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.
본연구지재탐토진핵번역연장인자1A1(eEF1A1)표체침묵대인급성T림파세포백혈병(T-ALL)세포주Jurkat증식、조망적영향급기작용궤제.응용실시PCR법화Western blot법분별별검측Jurkat세포화3례건강성인외주혈단개핵세포(PBMNC)중eEF1A1 mRNA화단백적표체.구건eEF1A1-shRNA만병독병감염Jurkat세포,령설공백화음성대조조,응용실시PCR법화Western blot법분별검측세포eEF1A1 mRNA화단백적표체；응용MTT법、Annexin V-APC표기법、DNA배체법분별검측세포증식、세포조망、세포주기,Western blot법검측세포PI3K/Akt신호통로상관신호분자적표체.결과표명,Jurkat세포eEF1A1 mRNA화단백적표체수평명현고우건강성인PBMNC중적표체(P＜0.01,P＜0.05)；구건적eEF1A1-shRNA만병독고효침묵Jurkat세포eEF1A1적표체.여음성대조조상비,eEF1A1-shRNA조Jurkat세포증식능력명현하강,조망명현증다,세포주기피조체우G0/G1기,p-Akt、NF-κB、p-NF-κB、mTOR、p-mTOR단백적표체명현하조.결론:eEF1A1재T-ALL세포중가능구유잠재적치암작용,기표체침묵가유효억제Jurkat세포적증식병유도조망,기궤제가능여하조PI3K/Akt/NF-κB화PI3K/Akt/mTOR신호통로유관.