CAJ | 학술논문

本研究目的在于利用化学杀雄剂“化杀灵WP1”锈导甘蓝型油菜R121产生雄性不育,并对花蕾中的差异表达基因进行分离、筛选及定量表达分析.首先,通过抑制消减杂交技术(SSH)和反向Northern斑点杂交技术,分离和筛选出在雄性不育花蕾中差异表达的基因片段.然后,将差异片段测序后在NCBI数据库中进行同源性比对及功能分析.最后,对差异表达基因进行反转录荧光定量表达(RT-QPCR)分析.本研究从筛选出来的6个阳性克隆中获得一个与多聚半乳糖醛酸酶基因(MF6) 100％同源的基因片段,该基因被认为与花粉生长发育及花粉成熟密切相关.对MF6基因在不同长度及不同育性花蕾中的表达量进行了定量分析,结果显示,MF6基因在雄性可育花蕾中的表达量均高于雄性不育花蕾,且在蕾长1.00 mm～1.50 mm和3.50 mm～4.00mm时分别达到了18.53倍和43.15倍的差异.因此,我们推测“化杀灵WP1”主要通过抑制花粉母细胞减数分裂时期中MF6基因的表达,使花粉产生败育:同时,MF6基因的表达可能也与花丝的伸长生长有关.
본연구목적재우이용화학살웅제“화살령WP1”수도감람형유채R121산생웅성불육,병대화뢰중적차이표체기인진행분리、사선급정량표체분석.수선,통과억제소감잡교기술(SSH)화반향Northern반점잡교기술,분리화사선출재웅성불육화뢰중차이표체적기인편단.연후,장차이편단측서후재NCBI수거고중진행동원성비대급공능분석.최후,대차이표체기인진행반전록형광정량표체(RT-QPCR)분석.본연구종사선출래적6개양성극륭중획득일개여다취반유당철산매기인(MF6) 100％동원적기인편단,해기인피인위여화분생장발육급화분성숙밀절상관.대MF6기인재불동장도급불동육성화뢰중적표체량진행료정량분석,결과현시,MF6기인재웅성가육화뢰중적표체량균고우웅성불육화뢰,차재뢰장1.00 mm～1.50 mm화3.50 mm～4.00mm시분별체도료18.53배화43.15배적차이.인차,아문추측“화살령WP1”주요통과억제화분모세포감수분렬시기중MF6기인적표체,사화분산생패육:동시,MF6기인적표체가능야여화사적신장생장유관.