国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2011年
9期
934-935
,共2页
宫颈肿瘤%细胞增殖%miR-146a
宮頸腫瘤%細胞增殖%miR-146a
궁경종류%세포증식%miR-146a
目的 构建miRNA-146a真核表达质粒,探讨其在宫颈癌HeLa细胞株中的表达及对HeLa细胞恶性表型的影响.方法 人工合成miRNA-146a基因序列,将miRNA-146a基因克隆到的真核表达载体pGeneSil-1中,构建成重组质粒pGeneSil-miR-146a.将miRNA-146a重组表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞株,通过荧光定量聚合酶链反应法(PCR)检测miRNA-146a在转录水平的表达.通过MTT法检测miRNA-146a对细胞增殖的影响,通过流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 经酶切和测序鉴定,证明重组质粒pGeneSil-miR-146a构建成功.重组质粒转染HeLa细胞后,荧光定量PCR证明能有效表达miRNA-146a.MTT检测结果显示转染miRNA-146a后的HeLa细胞活细胞数目明显增多.流式细胞术细胞周期检测结果表明转染miRNA-146a后的HeLa细胞S期细胞数明显增多.结论 成功构建了miRNA-146a基因真核表达载体pGeneSil-miR-146a,转染宫颈癌HeLa细胞株后能有效表达miRNA-146a,miRNA-146a基因表达可以促进HeLa细胞的增殖.
目的 構建miRNA-146a真覈錶達質粒,探討其在宮頸癌HeLa細胞株中的錶達及對HeLa細胞噁性錶型的影響.方法 人工閤成miRNA-146a基因序列,將miRNA-146a基因剋隆到的真覈錶達載體pGeneSil-1中,構建成重組質粒pGeneSil-miR-146a.將miRNA-146a重組錶達載體瞬時轉染宮頸癌HeLa細胞株,通過熒光定量聚閤酶鏈反應法(PCR)檢測miRNA-146a在轉錄水平的錶達.通過MTT法檢測miRNA-146a對細胞增殖的影響,通過流式細胞術檢測細胞週期的變化.結果 經酶切和測序鑒定,證明重組質粒pGeneSil-miR-146a構建成功.重組質粒轉染HeLa細胞後,熒光定量PCR證明能有效錶達miRNA-146a.MTT檢測結果顯示轉染miRNA-146a後的HeLa細胞活細胞數目明顯增多.流式細胞術細胞週期檢測結果錶明轉染miRNA-146a後的HeLa細胞S期細胞數明顯增多.結論 成功構建瞭miRNA-146a基因真覈錶達載體pGeneSil-miR-146a,轉染宮頸癌HeLa細胞株後能有效錶達miRNA-146a,miRNA-146a基因錶達可以促進HeLa細胞的增殖.
목적 구건miRNA-146a진핵표체질립,탐토기재궁경암HeLa세포주중적표체급대HeLa세포악성표형적영향.방법 인공합성miRNA-146a기인서렬,장miRNA-146a기인극륭도적진핵표체재체pGeneSil-1중,구건성중조질립pGeneSil-miR-146a.장miRNA-146a중조표체재체순시전염궁경암HeLa세포주,통과형광정량취합매련반응법(PCR)검측miRNA-146a재전록수평적표체.통과MTT법검측miRNA-146a대세포증식적영향,통과류식세포술검측세포주기적변화.결과 경매절화측서감정,증명중조질립pGeneSil-miR-146a구건성공.중조질립전염HeLa세포후,형광정량PCR증명능유효표체miRNA-146a.MTT검측결과현시전염miRNA-146a후적HeLa세포활세포수목명현증다.류식세포술세포주기검측결과표명전염miRNA-146a후적HeLa세포S기세포수명현증다.결론 성공구건료miRNA-146a기인진핵표체재체pGeneSil-miR-146a,전염궁경암HeLa세포주후능유효표체miRNA-146a,miRNA-146a기인표체가이촉진HeLa세포적증식.
