中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
1期
45-49
,共5页
季新成%黄玲%段晓东%员丽娟%牛国辉%于学辉%曾新强%张彦明
季新成%黃玲%段曉東%員麗娟%牛國輝%于學輝%曾新彊%張彥明
계신성%황령%단효동%원려연%우국휘%우학휘%증신강%장언명
牛精液%基因I型BVDV%荧光定量RT-PCR检测%血清抗体检测
牛精液%基因I型BVDV%熒光定量RT-PCR檢測%血清抗體檢測
우정액%기인I형BVDV%형광정량RT-PCR검측%혈청항체검측
为建立牛精液中基因I型牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)的快速检测方法,本研究采用Sephycral S-400凝胶对牛精液过滤处理后提取病毒核酸,根据BVDV-1 5'UTR保守区基因序列,设计特异性引物和荧光探针,通过反应条件的优化,建立了牛精液中BVDV-1荧光定量RT-PCR检测方法.该方法可以检测到牛精液中含量为0.0125 TCID50的病毒,灵敏度比病毒分离方法高200倍～2000倍,比常规RT-PCR方法高10倍.对从同一个牛场6个月内采集的120份新鲜牛精液和40份冷冻牛精液用该荧光RT-PCR方法检测,没有检测到BVDV-1阳性样品.对其中的10头牛定期检测精液中病毒的同时,并同步检测了全血中的病毒和血清抗体,结果血清抗体阳性牛精液中没有检测到病毒,本研究结果表明,不能以血清抗体阴阳性做为精液是否带毒的依据.
為建立牛精液中基因I型牛病毒性腹瀉病毒(BVDV-1)的快速檢測方法,本研究採用Sephycral S-400凝膠對牛精液過濾處理後提取病毒覈痠,根據BVDV-1 5'UTR保守區基因序列,設計特異性引物和熒光探針,通過反應條件的優化,建立瞭牛精液中BVDV-1熒光定量RT-PCR檢測方法.該方法可以檢測到牛精液中含量為0.0125 TCID50的病毒,靈敏度比病毒分離方法高200倍～2000倍,比常規RT-PCR方法高10倍.對從同一箇牛場6箇月內採集的120份新鮮牛精液和40份冷凍牛精液用該熒光RT-PCR方法檢測,沒有檢測到BVDV-1暘性樣品.對其中的10頭牛定期檢測精液中病毒的同時,併同步檢測瞭全血中的病毒和血清抗體,結果血清抗體暘性牛精液中沒有檢測到病毒,本研究結果錶明,不能以血清抗體陰暘性做為精液是否帶毒的依據.
위건립우정액중기인I형우병독성복사병독(BVDV-1)적쾌속검측방법,본연구채용Sephycral S-400응효대우정액과려처리후제취병독핵산,근거BVDV-1 5'UTR보수구기인서렬,설계특이성인물화형광탐침,통과반응조건적우화,건립료우정액중BVDV-1형광정량RT-PCR검측방법.해방법가이검측도우정액중함량위0.0125 TCID50적병독,령민도비병독분리방법고200배～2000배,비상규RT-PCR방법고10배.대종동일개우장6개월내채집적120빈신선우정액화40빈냉동우정액용해형광RT-PCR방법검측,몰유검측도BVDV-1양성양품.대기중적10두우정기검측정액중병독적동시,병동보검측료전혈중적병독화혈청항체,결과혈청항체양성우정액중몰유검측도병독,본연구결과표명,불능이혈청항체음양성주위정액시부대독적의거.
