CAJ | 학술논문

目的:了解缺血后适应(PC)对树鼩脑缺血时海马CA1区神经元磷脂酰肌醇-3激酶/Akt(PI-3K/Akt)下游底物丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt Ser-473/Thr-308)磷酸化(Akt[pS473]/Akt[pT308])的调控,探讨Akt信号转导通路在缺血PC脑保护中的作用机制.方法:以树鼩为实验动物,用光化学诱导法复制局部脑缺血,并于脑缺血后3 h 30 min反复夹闭缺血侧颈总动脉3个循环(5 min 1个循环)以制备后适应模型.在光镜、电镜下观察海马CA1区神经元损伤及其超微结构变化的同时,采用免疫组化法了解脑缺血树鼩海马CA1区神经元Akt[pS473]/Akt[pT308]的分布及定位,并以灰度值检测磷酸化强度.结果:脑缺血可导致树鼩海马损伤及细胞超微结构的明显异常;而缺血PC可使海马CA1区神经元超微结构的异常明显改善.免疫组化结果显示,对照组海马CA1区Akt[pS473]及 Akt [pT308]的磷酸化为阴性.缺血PC组与缺血组在不同时点的胞浆、胞膜均出现Akt[pS473],但缺血72h Akt[pS473]减弱(灰度值146.6±2.9).缺血组Akt [pT308]仅在4 h明显增强(灰度值135.5±2.2),随后则未检测到(灰度值分别为165.3±3.7,163.3±2.5).而缺血PC组4 h时点Akt [pT308]呈阴性,随后24 h、72 h则持续显著的阳性.结论:缺血PC能明显减轻海马CA1区神经元的缺血性损伤,其保护机制可能与 Akt Ser-473和Thr-308 2个位点磷酸化导致PI-3K/Akt信号转导途径的激活有关.
목적:료해결혈후괄응(PC)대수구뇌결혈시해마CA1구신경원린지선기순-3격매/Akt(PI-3K/Akt)하유저물사/소안산단백격매(Akt Ser-473/Thr-308)린산화(Akt[pS473]/Akt[pT308])적조공,탐토Akt신호전도통로재결혈PC뇌보호중적작용궤제.방법:이수구위실험동물,용광화학유도법복제국부뇌결혈,병우뇌결혈후3 h 30 min반복협폐결혈측경총동맥3개순배(5 min 1개순배)이제비후괄응모형.재광경、전경하관찰해마CA1구신경원손상급기초미결구변화적동시,채용면역조화법료해뇌결혈수구해마CA1구신경원Akt[pS473]/Akt[pT308]적분포급정위,병이회도치검측린산화강도.결과:뇌결혈가도치수구해마손상급세포초미결구적명현이상;이결혈PC가사해마CA1구신경원초미결구적이상명현개선.면역조화결과현시,대조조해마CA1구Akt[pS473]급 Akt [pT308]적린산화위음성.결혈PC조여결혈조재불동시점적포장、포막균출현Akt[pS473],단결혈72h Akt[pS473]감약(회도치146.6±2.9).결혈조Akt [pT308]부재4 h명현증강(회도치135.5±2.2),수후칙미검측도(회도치분별위165.3±3.7,163.3±2.5).이결혈PC조4 h시점Akt [pT308]정음성,수후24 h、72 h칙지속현저적양성.결론:결혈PC능명현감경해마CA1구신경원적결혈성손상,기보호궤제가능여 Akt Ser-473화Thr-308 2개위점린산화도치PI-3K/Akt신호전도도경적격활유관.