生物医学工程与临床
生物醫學工程與臨床
생물의학공정여림상
BIOMEDICAL ENGINEERING AND CLINICAL MEDICINE
2010年
5期
374-377,封2
,共5页
陈华%田学忠%魏均强%唐佩福%王岩%张伯勋
陳華%田學忠%魏均彊%唐珮福%王巖%張伯勛
진화%전학충%위균강%당패복%왕암%장백훈
硫酸钙%人骨髓基质干细胞%实时定量聚合酶链反应%成骨机制
硫痠鈣%人骨髓基質榦細胞%實時定量聚閤酶鏈反應%成骨機製
류산개%인골수기질간세포%실시정량취합매련반응%성골궤제
目的 探讨硫酸钙(CS)对成骨诱导培养液诱导人骨髓基质干细胞(hBMSC)向成骨细胞转化及成骨基因改变的影响,以明确CS促进骨形成可能的分子生物学机制.方法 分离培养hBMSC,随机分为2组,第1周均用成骨诱导液培养,实验组在第2周改以含CS的成骨诱导培养液培养,而对照组仍继续使用成骨诱导培养液培养,实验第14天收集细胞,进行RNA的抽提、纯化和质量检测,并合成cDNA,用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞骨形态发生蛋白2(BMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达.细胞爬片后,用含或不含CS的成骨诱导培养液分别连续培养hBMSC,异硫氰酸荧光素(FITC)染色,荧光显微镜观察矿化结节形成情况.结果 两组细胞均生长并缓慢增殖,细胞生长形态和矿化结节形成情况分别在相差显微镜和荧光显微镜下观察无显著区别.但是与对照组相比,实验组BMP-2和VEGF相对表达量均增高(P<0.05).结论 CS可能具有潜在的骨诱导活性、能够促进骨形成,与含CS成骨诱导培养液诱导BMSC成骨基因表达上调有关.
目的 探討硫痠鈣(CS)對成骨誘導培養液誘導人骨髓基質榦細胞(hBMSC)嚮成骨細胞轉化及成骨基因改變的影響,以明確CS促進骨形成可能的分子生物學機製.方法 分離培養hBMSC,隨機分為2組,第1週均用成骨誘導液培養,實驗組在第2週改以含CS的成骨誘導培養液培養,而對照組仍繼續使用成骨誘導培養液培養,實驗第14天收集細胞,進行RNA的抽提、純化和質量檢測,併閤成cDNA,用實時定量聚閤酶鏈反應(qRT-PCR)檢測細胞骨形態髮生蛋白2(BMP-2)和血管內皮生長因子(VEGF)的錶達.細胞爬片後,用含或不含CS的成骨誘導培養液分彆連續培養hBMSC,異硫氰痠熒光素(FITC)染色,熒光顯微鏡觀察礦化結節形成情況.結果 兩組細胞均生長併緩慢增殖,細胞生長形態和礦化結節形成情況分彆在相差顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察無顯著區彆.但是與對照組相比,實驗組BMP-2和VEGF相對錶達量均增高(P<0.05).結論 CS可能具有潛在的骨誘導活性、能夠促進骨形成,與含CS成骨誘導培養液誘導BMSC成骨基因錶達上調有關.
목적 탐토류산개(CS)대성골유도배양액유도인골수기질간세포(hBMSC)향성골세포전화급성골기인개변적영향,이명학CS촉진골형성가능적분자생물학궤제.방법 분리배양hBMSC,수궤분위2조,제1주균용성골유도액배양,실험조재제2주개이함CS적성골유도배양액배양,이대조조잉계속사용성골유도배양액배양,실험제14천수집세포,진행RNA적추제、순화화질량검측,병합성cDNA,용실시정량취합매련반응(qRT-PCR)검측세포골형태발생단백2(BMP-2)화혈관내피생장인자(VEGF)적표체.세포파편후,용함혹불함CS적성골유도배양액분별련속배양hBMSC,이류청산형광소(FITC)염색,형광현미경관찰광화결절형성정황.결과 량조세포균생장병완만증식,세포생장형태화광화결절형성정황분별재상차현미경화형광현미경하관찰무현저구별.단시여대조조상비,실험조BMP-2화VEGF상대표체량균증고(P<0.05).결론 CS가능구유잠재적골유도활성、능구촉진골형성,여함CS성골유도배양액유도BMSC성골기인표체상조유관.
