四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
6期
1127-1129
,共3页
CFSE%实验性葡萄膜炎%活化T细胞
CFSE%實驗性葡萄膜炎%活化T細胞
CFSE%실험성포도막염%활화T세포
CFSE%Experimental autoimmune uveitis%Autoreactive T cell
目的 探讨荧光染料CFSE在实验性葡萄膜炎(EAU)抗原特异T细胞增殖研究中的应用价值. 方法 以人类光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)的多肽片段IRBP161-180为抗原,免疫B10RⅢ小鼠使其产生EAU.用CFSE荧光染料标记细胞,结合荧光单抗和流式细胞术,检测T细胞及其亚群在特异抗原刺激下,不同时间点细胞增殖的情况.结果 IRBP161-180刺激4 d后出现T淋巴细胞增殖分裂,表现为CFSE荧光强度的系列减半.使用荧光单抗双标记发现CD4~+ T和CD8~+ T细胞增殖反应不同步,CD8~+ T细胞较CD4~+T细胞增殖分裂更活跃,亲代细胞百分率下降更明显(P<0.01).结论 CFSE荧光标记技术是分析EAU抗原特异性T细胞及亚群增殖分裂的有力工具.
目的 探討熒光染料CFSE在實驗性葡萄膜炎(EAU)抗原特異T細胞增殖研究中的應用價值. 方法 以人類光感受器間維生素A類結閤蛋白(IRBP)的多肽片段IRBP161-180為抗原,免疫B10RⅢ小鼠使其產生EAU.用CFSE熒光染料標記細胞,結閤熒光單抗和流式細胞術,檢測T細胞及其亞群在特異抗原刺激下,不同時間點細胞增殖的情況.結果 IRBP161-180刺激4 d後齣現T淋巴細胞增殖分裂,錶現為CFSE熒光彊度的繫列減半.使用熒光單抗雙標記髮現CD4~+ T和CD8~+ T細胞增殖反應不同步,CD8~+ T細胞較CD4~+T細胞增殖分裂更活躍,親代細胞百分率下降更明顯(P<0.01).結論 CFSE熒光標記技術是分析EAU抗原特異性T細胞及亞群增殖分裂的有力工具.
목적 탐토형광염료CFSE재실험성포도막염(EAU)항원특이T세포증식연구중적응용개치. 방법 이인류광감수기간유생소A류결합단백(IRBP)적다태편단IRBP161-180위항원,면역B10RⅢ소서사기산생EAU.용CFSE형광염료표기세포,결합형광단항화류식세포술,검측T세포급기아군재특이항원자격하,불동시간점세포증식적정황.결과 IRBP161-180자격4 d후출현T림파세포증식분렬,표현위CFSE형광강도적계렬감반.사용형광단항쌍표기발현CD4~+ T화CD8~+ T세포증식반응불동보,CD8~+ T세포교CD4~+T세포증식분렬경활약,친대세포백분솔하강경명현(P<0.01).결론 CFSE형광표기기술시분석EAU항원특이성T세포급아군증식분렬적유력공구.
Objective To track T lymphocytes proliferation with vital dye CFSE in experimental autoimmune uveitis (EAU). Methods B10RIII mice were immunized with synthetic peptide of interphotoreceptor retinal-binding protein (IRBP161-180) to develop EAU. The proliferation of IRBP-specific T cell subsets was detected by CFSE staining, fluorescent antibody labeling, and flow cytometry. Results The IRBP-specific T cells divided after 4 days of stimulation with IRBP161-180, halving the fluorescence intensity. The proliferations of CD4~+ and CD8~+ T cells were asynchronous, with CD8~+ T cells dividing more vigorously and having more drop in percentage of parent cells(P<0. 01). Conclusion CFSE-Labeling can detect the proliferation of autoreactive T cells and their subsets in EAU effectively.
