CAJ | 학술논문

背景:目前绝大多数研究者将目标指向功能细胞,为改善细胞的生存环境而给予一些生长因子.睾丸支持细胞能分泌大量营养物质及生长因子,且其所具有的Fas配体町降低移植入体内后宿丰的免疫排斥.目的:探讨睾丸支持细胞对体外培养鼠胚胎人脑皮质细胞的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察实验,于2005-10/2007-09在首都医科大学生殖医学研究中心实验室完成.材料:健康SPF级10～15 d龄雄性ICR小鼠40只,用于提取睾丸支持细胞:15 d龄胎鼠40只,用于提取大脑皮质细胞.方法:将分离的大脑皮质细胞密度调整为2×109 L-1,分为2组:实验组接种F预铺有70%汇合传代的睾丸支持细胞培养瓶中,加入含体积分数为0.1的FBS、1×10U/L青霉素、0.01 g/L链霉素的DMEM/F12完全培养基,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度环境下培养17d:对照组接种丁预铺育0.05%多聚右旋赖氨酸的培养瓶中单独培养.主要观察指标:采用免疫组织化学法,免疫细胞化学法、免疫细胞荧光法进行细胞鉴定,检测神经元、神经球数量及酪氨酸羟化酶刚性率.结果:两组细胞神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白、酩氨酸羟化酶均争阳性表达.与培养2h比较,随培养时间的延长两组贴壁神经元数均明显减少(P＜0.01),但实验组各时间点贴擘神经元数均明显多于对照组(P＜0.01).实验组干培养3 d出现神绛球,数量多且变化较快,7d后开始争现明显的下降趋势,至17 d神经球接近消失:对照组仅可见散在巢蛋白阳性表达细胞,未出现神经球n实验组酪氨酸羟化酶阳性细胞率随培养时间的延长而逐渐升高,至11 d达高峰,且各培养时间点酪氨酸羟化酶阳性细胞率均高于对照组(P＜0.01).结论:睾丸支持细胞可有效促进鼠胎脑皮质细胞的贴壁及生长,在促进神经干细胞增殖的同时诱导其向多巴胺能神经元分化.
배경:목전절대다수연구자장목표지향공능세포,위개선세포적생존배경이급여일사생장인자.고환지지세포능분비대량영양물질급생장인자,차기소구유적Fas배체정강저이식입체내후숙봉적면역배척.목적:탐토고환지지세포대체외배양서배태인뇌피질세포적영향.설계、시간급지점:세포학체외관찰실험,우2005-10/2007-09재수도의과대학생식의학연구중심실험실완성.재료:건강SPF급10～15 d령웅성ICR소서40지,용우제취고환지지세포:15 d령태서40지,용우제취대뇌피질세포.방법:장분리적대뇌피질세포밀도조정위2×109 L-1,분위2조:실험조접충F예포유70%회합전대적고환지지세포배양병중,가입함체적분수위0.1적FBS、1×10U/L청매소、0.01 g/L련매소적DMEM/F12완전배양기,치우37℃、체적분수위0.05적CO2포화습도배경하배양17d:대조조접충정예포육0.05%다취우선뢰안산적배양병중단독배양.주요관찰지표:채용면역조직화학법,면역세포화학법、면역세포형광법진행세포감정,검측신경원、신경구수량급락안산간화매강성솔.결과:량조세포신경원특이성희순화매、소단백、명안산간화매균쟁양성표체.여배양2h비교,수배양시간적연장량조첩벽신경원수균명현감소(P＜0.01),단실험조각시간점첩벽신경원수균명현다우대조조(P＜0.01).실험조간배양3 d출현신강구,수량다차변화교쾌,7d후개시쟁현명현적하강추세,지17 d신경구접근소실:대조조부가견산재소단백양성표체세포,미출현신경구n실험조락안산간화매양성세포솔수배양시간적연장이축점승고,지11 d체고봉,차각배양시간점락안산간화매양성세포솔균고우대조조(P＜0.01).결론:고환지지세포가유효촉진서태뇌피질세포적첩벽급생장,재촉진신경간세포증식적동시유도기향다파알능신경원분화.