卫生研究
衛生研究
위생연구
JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH
2008年
5期
540-542
,共3页
崔志鸿%李鹏%刘晋袆%刘胜学%周燕虹%曹佳
崔誌鴻%李鵬%劉晉袆%劉勝學%週燕虹%曹佳
최지홍%리붕%류진위%류성학%주연홍%조가
有机污染物%水污染%H4IIE细胞%细胞色素P4501A1
有機汙染物%水汙染%H4IIE細胞%細胞色素P4501A1
유궤오염물%수오염%H4IIE세포%세포색소P4501A1
目的 以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表,研究2004~2005年度重庆市水源水中有机污染物对H4IIE细胞细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达的诱导.方法 固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增CYP1A1 mRNA,比较不同水样诱导H4IIE细胞CYP1A1mRNA表达的差异,用电泳迁移率实验(EMSA)检测CYP1A1启动子的激活情况.结果 CYP1A1引物则可以将4个水样12h和24h处理组细胞的cDNA扩增出条带,48h处理组只有2005年1月寸滩样和2005年1月大溪沟样处理的细胞能扩增出CYP1A1基因的条带,所有样品的72h处理组细胞都没有CYP1A1基因的扩增;4个水样处理H4IIE细胞24h后,均可在细胞核内形成可与标记的XRE探针结合的芳烃受体-芳烃受体核转移蛋白(AHR-ARNT)二聚体,从而在AHR-ARNT二聚体蛋白处呈现发光条带.结论 各水样均可激活CYP1A1基因的启动子XRE,也均可诱导H4IIE细胞CYP1A1 mRNA的表迭,CYP1A1 mRNA的表达量随处理时间的差异有所不同.
目的 以重慶市主城區大溪溝(嘉陵江)和吋灘(長江)兩箇點為代錶,研究2004~2005年度重慶市水源水中有機汙染物對H4IIE細胞細胞色素P450 1A1(CYP1A1)錶達的誘導.方法 固相萃取法萃取水中有機汙染物,將萃取的有機汙染物溶于二甲基亞砜(DMSO)中,對H4IIE細胞進行染毒,用逆轉錄.聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)擴增CYP1A1 mRNA,比較不同水樣誘導H4IIE細胞CYP1A1mRNA錶達的差異,用電泳遷移率實驗(EMSA)檢測CYP1A1啟動子的激活情況.結果 CYP1A1引物則可以將4箇水樣12h和24h處理組細胞的cDNA擴增齣條帶,48h處理組隻有2005年1月吋灘樣和2005年1月大溪溝樣處理的細胞能擴增齣CYP1A1基因的條帶,所有樣品的72h處理組細胞都沒有CYP1A1基因的擴增;4箇水樣處理H4IIE細胞24h後,均可在細胞覈內形成可與標記的XRE探針結閤的芳烴受體-芳烴受體覈轉移蛋白(AHR-ARNT)二聚體,從而在AHR-ARNT二聚體蛋白處呈現髮光條帶.結論 各水樣均可激活CYP1A1基因的啟動子XRE,也均可誘導H4IIE細胞CYP1A1 mRNA的錶迭,CYP1A1 mRNA的錶達量隨處理時間的差異有所不同.
목적 이중경시주성구대계구(가릉강)화촌탄(장강)량개점위대표,연구2004~2005년도중경시수원수중유궤오염물대H4IIE세포세포색소P450 1A1(CYP1A1)표체적유도.방법 고상췌취법췌취수중유궤오염물,장췌취적유궤오염물용우이갑기아풍(DMSO)중,대H4IIE세포진행염독,용역전록.취합매련식반응(RT-PCR)확증CYP1A1 mRNA,비교불동수양유도H4IIE세포CYP1A1mRNA표체적차이,용전영천이솔실험(EMSA)검측CYP1A1계동자적격활정황.결과 CYP1A1인물칙가이장4개수양12h화24h처리조세포적cDNA확증출조대,48h처리조지유2005년1월촌탄양화2005년1월대계구양처리적세포능확증출CYP1A1기인적조대,소유양품적72h처리조세포도몰유CYP1A1기인적확증;4개수양처리H4IIE세포24h후,균가재세포핵내형성가여표기적XRE탐침결합적방경수체-방경수체핵전이단백(AHR-ARNT)이취체,종이재AHR-ARNT이취체단백처정현발광조대.결론 각수양균가격활CYP1A1기인적계동자XRE,야균가유도H4IIE세포CYP1A1 mRNA적표질,CYP1A1 mRNA적표체량수처리시간적차이유소불동.