实用临床医学
實用臨床醫學
실용림상의학
Practical Clinical Medicine
2008年
10期
7-10,封2
,共5页
龚辉%朱水山%张弘英%刘海燕%詹亚平%杜芳腾
龔輝%硃水山%張弘英%劉海燕%詹亞平%杜芳騰
공휘%주수산%장홍영%류해연%첨아평%두방등
p73β基因%RT-PCR%克隆%肝肿瘤
p73β基因%RT-PCR%剋隆%肝腫瘤
p73β기인%RT-PCR%극륭%간종류
目的 扩增及鉴定包含人类p73基因TAp73β转录本蛋白编码区的cDNA片段,将此片段克隆入真核表达载体,转染肝癌细胞,观察其对肝癌细胞生物活性的影响.方法 从手术活体组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增TAp73β基因全长编码序列CDS(full-length coding sequence),目的 片段回收纯化后用限制性内切酶酶切及测序两种方法 鉴定目的 片段正确与否并检测其纯度、浓度;并转染肝癌Hep3B细胞,用MTT法进行细胞凋亡检测.结果 该扩增片段经限制性核酸内切酶酶切图谱分析,与预期结果 吻合,转染的肝癌Hep3B细胞出现凋亡.结论 包含人类p73基因TAp73β转录本蛋白编码区的cDNA片段被成功扩增且末端带有限制性核酸内切酶Xba Ⅰ、KpnⅠ识别序列,它对肝癌细胞有抑制作用,从而为临床上肝癌的治疗提供了新思路.
目的 擴增及鑒定包含人類p73基因TAp73β轉錄本蛋白編碼區的cDNA片段,將此片段剋隆入真覈錶達載體,轉染肝癌細胞,觀察其對肝癌細胞生物活性的影響.方法 從手術活體組織中提取總RNA,採用RT-PCR技術擴增TAp73β基因全長編碼序列CDS(full-length coding sequence),目的 片段迴收純化後用限製性內切酶酶切及測序兩種方法 鑒定目的 片段正確與否併檢測其純度、濃度;併轉染肝癌Hep3B細胞,用MTT法進行細胞凋亡檢測.結果 該擴增片段經限製性覈痠內切酶酶切圖譜分析,與預期結果 吻閤,轉染的肝癌Hep3B細胞齣現凋亡.結論 包含人類p73基因TAp73β轉錄本蛋白編碼區的cDNA片段被成功擴增且末耑帶有限製性覈痠內切酶Xba Ⅰ、KpnⅠ識彆序列,它對肝癌細胞有抑製作用,從而為臨床上肝癌的治療提供瞭新思路.
목적 확증급감정포함인류p73기인TAp73β전록본단백편마구적cDNA편단,장차편단극륭입진핵표체재체,전염간암세포,관찰기대간암세포생물활성적영향.방법 종수술활체조직중제취총RNA,채용RT-PCR기술확증TAp73β기인전장편마서렬CDS(full-length coding sequence),목적 편단회수순화후용한제성내절매매절급측서량충방법 감정목적 편단정학여부병검측기순도、농도;병전염간암Hep3B세포,용MTT법진행세포조망검측.결과 해확증편단경한제성핵산내절매매절도보분석,여예기결과 문합,전염적간암Hep3B세포출현조망.결론 포함인류p73기인TAp73β전록본단백편마구적cDNA편단피성공확증차말단대유한제성핵산내절매Xba Ⅰ、KpnⅠ식별서렬,타대간암세포유억제작용,종이위림상상간암적치료제공료신사로.
