人源性Notch 1胞内段真核表达载体的构建及鉴定
인원성Notch 1포내단진핵표체재체적구건급감정
Construction and identification of the eukaryotic expression vector of human Notch 1 intracellular domain
  • 万方数据
    中华神经外科疾病研究杂志 중화신경외과질병연구잡지
    CHINESE JOURNAL OF NEUROSURGICAL DISEASE RESEARCH
    2008年 1期 32-36 ,共5页

    李斌%梁亮%甄海宁%林伟%晁晓东%董文鹏%李娟%章翔

    리빈%량량%견해저%림위%조효동%동문붕%리연%장상

    Notch信号%胶质细胞瘤%真核表达 Notch信號%膠質細胞瘤%真覈錶達
    Notch신호%효질세포류%진핵표체
    目的 构建人源性Notch 1胞内段(NICD)真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,并观察其在真核细胞中的表达.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人脑胶质母细胞瘤细胞系U251细胞中获得编码NICD的cDNA,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP;经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内NICD的表达.结果 构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,将其转染HeLa细胞72 h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内NICD的表达显著增高.结论 成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-NICD,为研究Notch信号通路在人脑胶质细胞瘤发生发展中的作用机制奠定了基础.
    목적 구건인원성Notch 1포내단(NICD)진핵표체재체pIRES2-EGFP-NICD,병관찰기재진핵세포중적표체.방법 통과반전록-취합매련반응(RT-PCR)종인뇌효질모세포류세포계U251세포중획득편마NICD적cDNA,정향극륭지진핵표체재체pIRES2-EGFP;경매절화측서감정정학후,응용지질체법전염HeLa세포,병통과단백면역인적법검측세포내NICD적표체.결과 구건료진핵표체재체pIRES2-EGFP-NICD,장기전염HeLa세포72 h후,단백면역인적법검측도세포내NICD적표체현저증고.결론 성공구건료진핵표체재체pIRES2-EGFP-NICD,위연구Notch신호통로재인뇌효질세포류발생발전중적작용궤제전정료기출.
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