微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2008年
1期
5-9
,共5页
邓名荣%龙良鲲%朱红惠%曲新勇
鄧名榮%龍良鯤%硃紅惠%麯新勇
산명영%룡량곤%주홍혜%곡신용
类橡胶蛋白%AbAMP1%重组表达%抑菌活性
類橡膠蛋白%AbAMP1%重組錶達%抑菌活性
류상효단백%AbAMP1%중조표체%억균활성
将类橡胶蛋白AbAMP1基因克隆至pPIC9,获得重组载体pPIC9-Ab,线性化后转化Pichia pastoris SMD1163,筛选获得阳性转化子.取表型为Mut*的转化子AS16进行诱导表达,上清经Tricine-SDS-PAGE分析,在约4.7 kD处有一条较强主带,与AbAMP1的预期大小相符,表明获得高效表达.上清经酸性非变性电泳后,用凝胶琼脂糖弥散法测定其抑菌活性,在含Bacillus thuringiensis琼脂糖平板AbAMP1对应处有一明显抑菌带,说明重组表达的AbAMP1具有天然活性.上清液抑菌活性试验显示,AbAMP1对Fusarium oxysporum f.sp.cubense以及B.thuringiensis,B.subtilis,Staphylococcus aureus等G+细菌均有显著的抑制作用,而对其它供试丝状真菌、酵母菌以及G-细菌无明显抑制作用.
將類橡膠蛋白AbAMP1基因剋隆至pPIC9,穫得重組載體pPIC9-Ab,線性化後轉化Pichia pastoris SMD1163,篩選穫得暘性轉化子.取錶型為Mut*的轉化子AS16進行誘導錶達,上清經Tricine-SDS-PAGE分析,在約4.7 kD處有一條較彊主帶,與AbAMP1的預期大小相符,錶明穫得高效錶達.上清經痠性非變性電泳後,用凝膠瓊脂糖瀰散法測定其抑菌活性,在含Bacillus thuringiensis瓊脂糖平闆AbAMP1對應處有一明顯抑菌帶,說明重組錶達的AbAMP1具有天然活性.上清液抑菌活性試驗顯示,AbAMP1對Fusarium oxysporum f.sp.cubense以及B.thuringiensis,B.subtilis,Staphylococcus aureus等G+細菌均有顯著的抑製作用,而對其它供試絲狀真菌、酵母菌以及G-細菌無明顯抑製作用.
장류상효단백AbAMP1기인극륭지pPIC9,획득중조재체pPIC9-Ab,선성화후전화Pichia pastoris SMD1163,사선획득양성전화자.취표형위Mut*적전화자AS16진행유도표체,상청경Tricine-SDS-PAGE분석,재약4.7 kD처유일조교강주대,여AbAMP1적예기대소상부,표명획득고효표체.상청경산성비변성전영후,용응효경지당미산법측정기억균활성,재함Bacillus thuringiensis경지당평판AbAMP1대응처유일명현억균대,설명중조표체적AbAMP1구유천연활성.상청액억균활성시험현시,AbAMP1대Fusarium oxysporum f.sp.cubense이급B.thuringiensis,B.subtilis,Staphylococcus aureus등G+세균균유현저적억제작용,이대기타공시사상진균、효모균이급G-세균무명현억제작용.
