肿瘤防治研究
腫瘤防治研究
종류방치연구
CANCER RESEARCH ON PREVENTION AND TREATMENT
2007年
11期
836-838,841
,共4页
颜廷东%宋娜玲%赵启仁%刘家慧%贺欣%褚丽萍%张春明
顏廷東%宋娜玲%趙啟仁%劉傢慧%賀訢%褚麗萍%張春明
안정동%송나령%조계인%류가혜%하흔%저려평%장춘명
tumstatin%肿瘤新生血管生成抑制因子%基因克隆和表达
tumstatin%腫瘤新生血管生成抑製因子%基因剋隆和錶達
tumstatin%종류신생혈관생성억제인자%기인극륭화표체
目的 重组表达人tumstatin,为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础.方法 提取HEK293细胞总RNA,通过RT-PCR扩增人tumstatin基因,导入pMD19-T,测序,然后亚克隆至pET28a,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定.结果 提取的总RNA经电泳,有清晰的28S和18S两条带.RT-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致.测序证实tumstatin基因正确插入载体中.重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达,表达量约占菌体总蛋白量的30%.Western blot证实所表达蛋白为目的 蛋白.结论 重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中高效表达,为进一步的tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础.
目的 重組錶達人tumstatin,為人tumstatin的腫瘤受體顯像奠定基礎.方法 提取HEK293細胞總RNA,通過RT-PCR擴增人tumstatin基因,導入pMD19-T,測序,然後亞剋隆至pET28a,IPTG誘導錶達,產物進行SDS-PAGE分析和Western blot鑒定.結果 提取的總RNA經電泳,有清晰的28S和18S兩條帶.RT-PCR擴增產物長度與理論值750bp相一緻.測序證實tumstatin基因正確插入載體中.重組人tumstatin在大腸桿菌中高效錶達,錶達量約佔菌體總蛋白量的30%.Western blot證實所錶達蛋白為目的 蛋白.結論 重組人tumstatin蛋白在大腸桿菌中高效錶達,為進一步的tumstatin的腫瘤受體顯像奠定基礎.
목적 중조표체인tumstatin,위인tumstatin적종류수체현상전정기출.방법 제취HEK293세포총RNA,통과RT-PCR확증인tumstatin기인,도입pMD19-T,측서,연후아극륭지pET28a,IPTG유도표체,산물진행SDS-PAGE분석화Western blot감정.결과 제취적총RNA경전영,유청석적28S화18S량조대.RT-PCR확증산물장도여이론치750bp상일치.측서증실tumstatin기인정학삽입재체중.중조인tumstatin재대장간균중고효표체,표체량약점균체총단백량적30%.Western blot증실소표체단백위목적 단백.결론 중조인tumstatin단백재대장간균중고효표체,위진일보적tumstatin적종류수체현상전정기출.
