CAJ | 학술논문

目的:为改善纯钛的生物活性,对其表面进行梯度氧化钛生物活性涂层修饰,观察前成骨细胞MC3T3-E1在梯度氧化钛涂层修饰的钛上的黏附、增殖、形态和分化,评价该梯度涂层的生物活性.方法:实验于2006-03/12在清华大学生物膜与膜生物工程国家重点实验室完成.①梯度涂层的制备:先用阳极氧化的方法在纯钛上制备一层致密的氧化钛膜,而后在该致密膜上用微弧氧化法生成一层多孔的氧化钛膜.②细胞接种:将前成骨细胞MC3T3-E1接种到梯度涂层修饰的钛试件上(梯度改性试件),未修饰的钛和只有一层氧化钛修饰的钛试件也同样接种细胞作为参照.③观察指标:接种3 h和6 h后用MTT的方法检测细胞的黏附情况;培养3 d后用扫描电镜观察细胞的生长形态;分别在培养7,14和21 d后用MTT的方法分析MC3T3-E1细胞的增殖情况;将接种细胞的3种试件放于诱导培养基中,诱导培养28 d后通过检测碱性磷酸酶的活性来分析细胞向成骨细胞的分化情况.结果:①接种3 h后,在未修饰的钛和氧化改性试件上黏附的细胞数相近,比在梯度改性试件上的黏附细胞数要少;6 h后在梯度改性试件上的细胞数的增加更显著,是未修饰的钛上细胞数的1.5倍.②培养3 d后扫描电镜观察到细胞在所有材料上都能够正常生长,细胞在3种材料上的形态比较相似,都表现出正常MC3T3-E1细胞的形态.③MC3T3-E1细胞在所有试件上都随时间而有所增殖.在梯度改性试件上的细胞数最高,未修饰的钛上的细胞数最少,在7 d的差别不是很明显,而第21天时梯度改性试件上的细胞数是纯钛上细胞数的4倍.④在诱导培养基中培养28 d后,在梯度改性试件上培养的MC3T3-E1细胞的碱性磷酸酶活性是最高的,是纯钛试件的2倍.结论:MC3T3-E1细胞在梯度改性试件上的黏附、增殖和分化都是3种试件中最好的,表明梯度氧化钛涂层修饰的钛比纯钛或只有一层氧化钛修饰的钛都具有更好的生物活性. 目的:為改善純鈦的生物活性,對其錶麵進行梯度氧化鈦生物活性塗層脩飾,觀察前成骨細胞MC3T3-E1在梯度氧化鈦塗層脩飾的鈦上的黏附、增殖、形態和分化,評價該梯度塗層的生物活性.方法:實驗于2006-03/12在清華大學生物膜與膜生物工程國傢重點實驗室完成.①梯度塗層的製備:先用暘極氧化的方法在純鈦上製備一層緻密的氧化鈦膜,而後在該緻密膜上用微弧氧化法生成一層多孔的氧化鈦膜.②細胞接種:將前成骨細胞MC3T3-E1接種到梯度塗層脩飾的鈦試件上(梯度改性試件),未脩飾的鈦和隻有一層氧化鈦脩飾的鈦試件也同樣接種細胞作為參照.③觀察指標:接種3 h和6 h後用MTT的方法檢測細胞的黏附情況;培養3 d後用掃描電鏡觀察細胞的生長形態;分彆在培養7,14和21 d後用MTT的方法分析MC3T3-E1細胞的增殖情況;將接種細胞的3種試件放于誘導培養基中,誘導培養28 d後通過檢測堿性燐痠酶的活性來分析細胞嚮成骨細胞的分化情況.結果:①接種3 h後,在未脩飾的鈦和氧化改性試件上黏附的細胞數相近,比在梯度改性試件上的黏附細胞數要少;6 h後在梯度改性試件上的細胞數的增加更顯著,是未脩飾的鈦上細胞數的1.5倍.②培養3 d後掃描電鏡觀察到細胞在所有材料上都能夠正常生長,細胞在3種材料上的形態比較相似,都錶現齣正常MC3T3-E1細胞的形態.③MC3T3-E1細胞在所有試件上都隨時間而有所增殖.在梯度改性試件上的細胞數最高,未脩飾的鈦上的細胞數最少,在7 d的差彆不是很明顯,而第21天時梯度改性試件上的細胞數是純鈦上細胞數的4倍.④在誘導培養基中培養28 d後,在梯度改性試件上培養的MC3T3-E1細胞的堿性燐痠酶活性是最高的,是純鈦試件的2倍.結論:MC3T3-E1細胞在梯度改性試件上的黏附、增殖和分化都是3種試件中最好的,錶明梯度氧化鈦塗層脩飾的鈦比純鈦或隻有一層氧化鈦脩飾的鈦都具有更好的生物活性.
목적:위개선순태적생물활성,대기표면진행제도양화태생물활성도층수식,관찰전성골세포MC3T3-E1재제도양화태도층수식적태상적점부、증식、형태화분화,평개해제도도층적생물활성.방법:실험우2006-03/12재청화대학생물막여막생물공정국가중점실험실완성.①제도도층적제비:선용양겁양화적방법재순태상제비일층치밀적양화태막,이후재해치밀막상용미호양화법생성일층다공적양화태막.②세포접충:장전성골세포MC3T3-E1접충도제도도층수식적태시건상(제도개성시건),미수식적태화지유일층양화태수식적태시건야동양접충세포작위삼조.③관찰지표:접충3 h화6 h후용MTT적방법검측세포적점부정황;배양3 d후용소묘전경관찰세포적생장형태;분별재배양7,14화21 d후용MTT적방법분석MC3T3-E1세포적증식정황;장접충세포적3충시건방우유도배양기중,유도배양28 d후통과검측감성린산매적활성래분석세포향성골세포적분화정황.결과:①접충3 h후,재미수식적태화양화개성시건상점부적세포수상근,비재제도개성시건상적점부세포수요소;6 h후재제도개성시건상적세포수적증가경현저,시미수식적태상세포수적1.5배.②배양3 d후소묘전경관찰도세포재소유재료상도능구정상생장,세포재3충재료상적형태비교상사,도표현출정상MC3T3-E1세포적형태.③MC3T3-E1세포재소유시건상도수시간이유소증식.재제도개성시건상적세포수최고,미수식적태상적세포수최소,재7 d적차별불시흔명현,이제21천시제도개성시건상적세포수시순태상세포수적4배.④재유도배양기중배양28 d후,재제도개성시건상배양적MC3T3-E1세포적감성린산매활성시최고적,시순태시건적2배.결론:MC3T3-E1세포재제도개성시건상적점부、증식화분화도시3충시건중최호적,표명제도양화태도층수식적태비순태혹지유일층양화태수식적태도구유경호적생물활성.