华中农业大学学报（自然科学版）
華中農業大學學報（自然科學版）
화중농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
5期
637-641
,共5页
吸水链霉菌NRRL5491%雷帕霉素%接合转移
吸水鏈黴菌NRRL5491%雷帕黴素%接閤轉移
흡수련매균NRRL5491%뢰파매소%접합전이
对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统.40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3～6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1 μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50 μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍.采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10-6,足够用于基因置换等遗传操作.
對標準的鏈黴菌接閤轉移方法進行優化建立起適用于吸水鏈黴菌NRRL5491的接閤轉移繫統.40℃溫浴20 min為孢子的最佳熱激處理條件;整閤型質粒pSET152的接閤轉移效率是穿梭型質粒pOJ446的3～6倍;噹阿泊拉黴素覆蓋濃度為1 μg/mL時,pSET152的接閤轉移效率是50 μg/mL時的4.6倍,而pOJ446接閤轉移效率相應提高瞭2.4倍;MS培養基上接閤轉移效率是SY瓊脂培養基上的3.4倍.採用最適優化條件時,接閤轉移頻率可達到2×10-6,足夠用于基因置換等遺傳操作.
대표준적련매균접합전이방법진행우화건립기괄용우흡수련매균NRRL5491적접합전이계통.40℃온욕20 min위포자적최가열격처리조건;정합형질립pSET152적접합전이효솔시천사형질립pOJ446적3～6배;당아박랍매소복개농도위1 μg/mL시,pSET152적접합전이효솔시50 μg/mL시적4.6배,이pOJ446접합전이효솔상응제고료2.4배;MS배양기상접합전이효솔시SY경지배양기상적3.4배.채용최괄우화조건시,접합전이빈솔가체도2×10-6,족구용우기인치환등유전조작.
