色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2007年
4期
501-504
,共4页
全妙华%曾雄智%皮建辉%邓梅春%梁宋平
全妙華%曾雄智%皮建輝%鄧梅春%樑宋平
전묘화%증웅지%피건휘%산매춘%량송평
化学合成%敬钊毒素-V剪切体%复性%钠离子通道
化學閤成%敬釗毒素-V剪切體%複性%鈉離子通道
화학합성%경쇠독소-V전절체%복성%납리자통도
应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化学合成了敬钊毒素-V(JZTX-V)分子N-端酪氨酸残基剪切体(Y1-JZTX-V),并且通过反相高效液相色谱和质谱对不同条件下的氧化复性结果进行监测,从而得到该剪切体的最佳氧化复性条件:0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液、pH 7.50、1 mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)、0.1 mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSG)、样品浓度为0.05 mg/L、复性温度为4 ℃.膜片钳电生理实验结果显示敬钊毒素-V剪切体Y1-JZTX-V对大鼠背根神经节(DRG)细胞上表达的河豚毒素不敏感型(TTX-R)与河豚毒素敏感型(TTX-S)钠电流均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为(160±2.5)nmol/L和(39.6±3.2)nmol/L.与天然的敬钊毒素-V相比,该剪切体对大鼠DRG细胞上的TTX-S钠电流的抑制作用基本一致,但对TTX-R钠电流的抑制作用却大大降低,表明敬钊毒素-V分子N-端的酪氨酸残基是一个与TTX-R钠通道结合活性相关的氨基酸残基.
應用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化學閤成瞭敬釗毒素-V(JZTX-V)分子N-耑酪氨痠殘基剪切體(Y1-JZTX-V),併且通過反相高效液相色譜和質譜對不同條件下的氧化複性結果進行鑑測,從而得到該剪切體的最佳氧化複性條件:0.1 mol/L Tris-HCl緩遲液、pH 7.50、1 mmol/L還原型穀胱甘肽(GSH)、0.1 mmol/L氧化型穀胱甘肽(GSSG)、樣品濃度為0.05 mg/L、複性溫度為4 ℃.膜片鉗電生理實驗結果顯示敬釗毒素-V剪切體Y1-JZTX-V對大鼠揹根神經節(DRG)細胞上錶達的河豚毒素不敏感型(TTX-R)與河豚毒素敏感型(TTX-S)鈉電流均有抑製作用,其半數抑製濃度(IC50)分彆為(160±2.5)nmol/L和(39.6±3.2)nmol/L.與天然的敬釗毒素-V相比,該剪切體對大鼠DRG細胞上的TTX-S鈉電流的抑製作用基本一緻,但對TTX-R鈉電流的抑製作用卻大大降低,錶明敬釗毒素-V分子N-耑的酪氨痠殘基是一箇與TTX-R鈉通道結閤活性相關的氨基痠殘基.
응용물갑양탄기(Fmoc)고상방법화학합성료경쇠독소-V(JZTX-V)분자N-단락안산잔기전절체(Y1-JZTX-V),병차통과반상고효액상색보화질보대불동조건하적양화복성결과진행감측,종이득도해전절체적최가양화복성조건:0.1 mol/L Tris-HCl완충액、pH 7.50、1 mmol/L환원형곡광감태(GSH)、0.1 mmol/L양화형곡광감태(GSSG)、양품농도위0.05 mg/L、복성온도위4 ℃.막편겸전생리실험결과현시경쇠독소-V전절체Y1-JZTX-V대대서배근신경절(DRG)세포상표체적하돈독소불민감형(TTX-R)여하돈독소민감형(TTX-S)납전류균유억제작용,기반수억제농도(IC50)분별위(160±2.5)nmol/L화(39.6±3.2)nmol/L.여천연적경쇠독소-V상비,해전절체대대서DRG세포상적TTX-S납전류적억제작용기본일치,단대TTX-R납전류적억제작용각대대강저,표명경쇠독소-V분자N-단적락안산잔기시일개여TTX-R납통도결합활성상관적안기산잔기.
