CAJ | 학술논문

目的:观察人截短型凋亡诱导因子(AIF△1-400)对HeLa细胞的促凋亡作用.方法:在AIF△1-120基因克隆成功的基础上进一步改造,构建截去AIF基因线粒体定位信号,FAD结合结构域和NADH结合结构域(1-400位氨基酸)编码序列的AIF△1-400基因,将其克隆入pcDNA3和pIRES2-EGFP真核表达载体,用脂质体法转染HeLa细胞,通过荧光显微镜观察,MTT检测等方法检测该基因在转染细胞中的表达及其对肿瘤细胞的促凋亡活性.结果:经酶切鉴定与测序证实,带有AIF△1-400的真核表达载体构建成功.瞬时转染后出现细胞形态变化,随转染时间的延长转染细胞数减少,荧光变弱.经间接免疫荧光检测可观察到截短型AIF蛋白位于细胞质中,部分已位于细胞核内.MTT法检测发现AIF△1-400转染后对细胞生长有明显的抑制作用.结论:AIF△1-400仍然具有诱导HeLa细胞凋亡的作用.
목적:관찰인절단형조망유도인자(AIF△1-400)대HeLa세포적촉조망작용.방법:재AIF△1-120기인극륭성공적기출상진일보개조,구건절거AIF기인선립체정위신호,FAD결합결구역화NADH결합결구역(1-400위안기산)편마서렬적AIF△1-400기인,장기극륭입pcDNA3화pIRES2-EGFP진핵표체재체,용지질체법전염HeLa세포,통과형광현미경관찰,MTT검측등방법검측해기인재전염세포중적표체급기대종류세포적촉조망활성.결과:경매절감정여측서증실,대유AIF△1-400적진핵표체재체구건성공.순시전염후출현세포형태변화,수전염시간적연장전염세포수감소,형광변약.경간접면역형광검측가관찰도절단형AIF단백위우세포질중,부분이위우세포핵내.MTT법검측발현AIF△1-400전염후대세포생장유명현적억제작용.결론:AIF△1-400잉연구유유도HeLa세포조망적작용.