第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2006年
5期
412-415
,共4页
CCR5%人工手动HTL表位%包涵体%复性%自体疫苗%HIV-1感染
CCR5%人工手動HTL錶位%包涵體%複性%自體疫苗%HIV-1感染
CCR5%인공수동HTL표위%포함체%복성%자체역묘%HIV-1감염
目的:构建趋化因子受体5(CCR5)胞外段重组蛋白(命名为:rCCR5)原核表达载体,并进行诱导表达.对表达产物进行纯化和鉴定.方法:截取CCR5胞外结构4个片段N-Term,ECL1, ECL2和ECL3的氨基酸序列,应用柔性linker分别串联,模拟CCR5胞外结构,依据大肠杆菌偏爱密码子人工合成基因.运用基因重组方法在大肠杆菌中进行表达,表达产物经纯化、复性后进行Western blot鉴定.结果:目的蛋白以包涵体形式存在,经包涵体洗涤、变性溶解,SephacrylS-300凝胶过滤层析及SephacrylS-100凝胶柱复性获得了纯化的蛋白质,目的蛋白能与CCR5 mAb特异性结合.结论:获得了大量纯化的rCCR5重组蛋白,可作为研制CCR5自体蛋白疫苗以阻断HIV-1感染的候选抗原蛋白.
目的:構建趨化因子受體5(CCR5)胞外段重組蛋白(命名為:rCCR5)原覈錶達載體,併進行誘導錶達.對錶達產物進行純化和鑒定.方法:截取CCR5胞外結構4箇片段N-Term,ECL1, ECL2和ECL3的氨基痠序列,應用柔性linker分彆串聯,模擬CCR5胞外結構,依據大腸桿菌偏愛密碼子人工閤成基因.運用基因重組方法在大腸桿菌中進行錶達,錶達產物經純化、複性後進行Western blot鑒定.結果:目的蛋白以包涵體形式存在,經包涵體洗滌、變性溶解,SephacrylS-300凝膠過濾層析及SephacrylS-100凝膠柱複性穫得瞭純化的蛋白質,目的蛋白能與CCR5 mAb特異性結閤.結論:穫得瞭大量純化的rCCR5重組蛋白,可作為研製CCR5自體蛋白疫苗以阻斷HIV-1感染的候選抗原蛋白.
목적:구건추화인자수체5(CCR5)포외단중조단백(명명위:rCCR5)원핵표체재체,병진행유도표체.대표체산물진행순화화감정.방법:절취CCR5포외결구4개편단N-Term,ECL1, ECL2화ECL3적안기산서렬,응용유성linker분별천련,모의CCR5포외결구,의거대장간균편애밀마자인공합성기인.운용기인중조방법재대장간균중진행표체,표체산물경순화、복성후진행Western blot감정.결과:목적단백이포함체형식존재,경포함체세조、변성용해,SephacrylS-300응효과려층석급SephacrylS-100응효주복성획득료순화적단백질,목적단백능여CCR5 mAb특이성결합.결론:획득료대량순화적rCCR5중조단백,가작위연제CCR5자체단백역묘이조단HIV-1감염적후선항원단백.
