河南预防医学杂志
河南預防醫學雜誌
하남예방의학잡지
2006年
2期
79-79
,共1页
张晓琴%路浩%罗予%孟林敏
張曉琴%路浩%囉予%孟林敏
장효금%로호%라여%맹림민
隐孢子虫%18S rDNA%PCR
隱孢子蟲%18S rDNA%PCR
은포자충%18S rDNA%PCR
目的隐孢子虫病是一种人兽共患寄生虫病,在艾滋病病人和儿童中的感染率可分别高达48%和17.5%,可导致严重的水样腹泻甚至危及生命,免疫功能正常者也能感染出现急性自限性腹泻.本文通过不同软件对三株人源隐孢子虫分离株进行种类鉴定.方法参照Xiao L H 1999年发表的资料合成隐孢子虫18S rDNA特异性引物(上游引物:5'-AACCTGGTTGATCCTGCCAGTAGTC-3',下游引物:5'-TGAGCCTTCTGCAGGTTCACCTACG-3',由大连宝生物工程技术公司合成.),PCR扩增,产物测序、序列分别用Paup4.0、 Phylip3.6、 DNAstar4.0等软件分析并与12株隐孢子虫相应序列进行同源性分析,绘制了系统发育进化树,分析鉴定.1、2号株采自非免疫抑制病人,3号株采自免疫抑制病人.结果①三株隐孢子虫均能扩增出1700bp左右的目的片段.②构建系统发生树,用DNAstar4.0软件进行分析:1与2号株的同源性为99.8%,1和2号株与AF108864 C.parvum-cattle的同源性分别为99.5%和99.3%,与AF112569 C.hominis进化关系较远.3号株与AF112574 C.meleagridis(火鸡源C.meleagridis)的同源性为99.8%,3号株与C.suis (AF108861)的同源性为98.9%,而与AF108864 C.parvum-cattle、AF112569 C.hominis、AF108865 C.parvum(Homo sapiens)、AY642591 C.muris、AB210854 C.canis、AF108862 C.felis等均不处于同一进化枝,亲缘关系较远.利用PAUP4.0、Phylip3.6的方法与DNAstar4.0软件分析的结果基本一致.结论1和2号分离株均为C.parvum牛基因型,3号分离株是C.meleagridis(火鸡隐孢子虫).本文结果为深入研究人隐孢子虫病的分子流行病学打下基础.
目的隱孢子蟲病是一種人獸共患寄生蟲病,在艾滋病病人和兒童中的感染率可分彆高達48%和17.5%,可導緻嚴重的水樣腹瀉甚至危及生命,免疫功能正常者也能感染齣現急性自限性腹瀉.本文通過不同軟件對三株人源隱孢子蟲分離株進行種類鑒定.方法參照Xiao L H 1999年髮錶的資料閤成隱孢子蟲18S rDNA特異性引物(上遊引物:5'-AACCTGGTTGATCCTGCCAGTAGTC-3',下遊引物:5'-TGAGCCTTCTGCAGGTTCACCTACG-3',由大連寶生物工程技術公司閤成.),PCR擴增,產物測序、序列分彆用Paup4.0、 Phylip3.6、 DNAstar4.0等軟件分析併與12株隱孢子蟲相應序列進行同源性分析,繪製瞭繫統髮育進化樹,分析鑒定.1、2號株採自非免疫抑製病人,3號株採自免疫抑製病人.結果①三株隱孢子蟲均能擴增齣1700bp左右的目的片段.②構建繫統髮生樹,用DNAstar4.0軟件進行分析:1與2號株的同源性為99.8%,1和2號株與AF108864 C.parvum-cattle的同源性分彆為99.5%和99.3%,與AF112569 C.hominis進化關繫較遠.3號株與AF112574 C.meleagridis(火鷄源C.meleagridis)的同源性為99.8%,3號株與C.suis (AF108861)的同源性為98.9%,而與AF108864 C.parvum-cattle、AF112569 C.hominis、AF108865 C.parvum(Homo sapiens)、AY642591 C.muris、AB210854 C.canis、AF108862 C.felis等均不處于同一進化枝,親緣關繫較遠.利用PAUP4.0、Phylip3.6的方法與DNAstar4.0軟件分析的結果基本一緻.結論1和2號分離株均為C.parvum牛基因型,3號分離株是C.meleagridis(火鷄隱孢子蟲).本文結果為深入研究人隱孢子蟲病的分子流行病學打下基礎.
목적은포자충병시일충인수공환기생충병,재애자병병인화인동중적감염솔가분별고체48%화17.5%,가도치엄중적수양복사심지위급생명,면역공능정상자야능감염출현급성자한성복사.본문통과불동연건대삼주인원은포자충분리주진행충류감정.방법삼조Xiao L H 1999년발표적자료합성은포자충18S rDNA특이성인물(상유인물:5'-AACCTGGTTGATCCTGCCAGTAGTC-3',하유인물:5'-TGAGCCTTCTGCAGGTTCACCTACG-3',유대련보생물공정기술공사합성.),PCR확증,산물측서、서렬분별용Paup4.0、 Phylip3.6、 DNAstar4.0등연건분석병여12주은포자충상응서렬진행동원성분석,회제료계통발육진화수,분석감정.1、2호주채자비면역억제병인,3호주채자면역억제병인.결과①삼주은포자충균능확증출1700bp좌우적목적편단.②구건계통발생수,용DNAstar4.0연건진행분석:1여2호주적동원성위99.8%,1화2호주여AF108864 C.parvum-cattle적동원성분별위99.5%화99.3%,여AF112569 C.hominis진화관계교원.3호주여AF112574 C.meleagridis(화계원C.meleagridis)적동원성위99.8%,3호주여C.suis (AF108861)적동원성위98.9%,이여AF108864 C.parvum-cattle、AF112569 C.hominis、AF108865 C.parvum(Homo sapiens)、AY642591 C.muris、AB210854 C.canis、AF108862 C.felis등균불처우동일진화지,친연관계교원.이용PAUP4.0、Phylip3.6적방법여DNAstar4.0연건분석적결과기본일치.결론1화2호분리주균위C.parvum우기인형,3호분리주시C.meleagridis(화계은포자충).본문결과위심입연구인은포자충병적분자류행병학타하기출.
