动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2006年
1期
66-69
,共4页
周雪媚%霍惠玲%张飚%李永清%王连群
週雪媚%霍惠玲%張飚%李永清%王連群
주설미%곽혜령%장표%리영청%왕련군
禽流感病毒%HA1基因%克隆%原核表达
禽流感病毒%HA1基因%剋隆%原覈錶達
금류감병독%HA1기인%극륭%원핵표체
用RT-PCR方法扩增出禽流感病毒A/Muscovyduck/Fujian/2/2000(MF00)株部分HA基因,大小约900 bp,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行了序列的分析.通过BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点将HA基因亚克隆到原核表达载体pGEX4T-3上,成功构建了阳性重组表达质粒,并将阳性重组质粒转化BL21(DE3)菌株.经IPTG诱导表达,结果禽流感HA基因在pGEX4T-3系统中得到高效表达,经Western blotting检测证实表达产物有生物学活性.
用RT-PCR方法擴增齣禽流感病毒A/Muscovyduck/Fujian/2/2000(MF00)株部分HA基因,大小約900 bp,將其剋隆到pMD18-T載體上,併進行瞭序列的分析.通過BamHⅠ和XhoⅠ酶切位點將HA基因亞剋隆到原覈錶達載體pGEX4T-3上,成功構建瞭暘性重組錶達質粒,併將暘性重組質粒轉化BL21(DE3)菌株.經IPTG誘導錶達,結果禽流感HA基因在pGEX4T-3繫統中得到高效錶達,經Western blotting檢測證實錶達產物有生物學活性.
용RT-PCR방법확증출금류감병독A/Muscovyduck/Fujian/2/2000(MF00)주부분HA기인,대소약900 bp,장기극륭도pMD18-T재체상,병진행료서렬적분석.통과BamHⅠ화XhoⅠ매절위점장HA기인아극륭도원핵표체재체pGEX4T-3상,성공구건료양성중조표체질립,병장양성중조질립전화BL21(DE3)균주.경IPTG유도표체,결과금류감HA기인재pGEX4T-3계통중득도고효표체,경Western blotting검측증실표체산물유생물학활성.