中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2001年
5期
37-40
,共4页
杨秋林%陆惠民%黄伟达%施宓
楊鞦林%陸惠民%黃偉達%施宓
양추림%륙혜민%황위체%시복
弓形虫%ROP1%PCR%基因表达
弓形蟲%ROP1%PCR%基因錶達
궁형충%ROP1%PCR%기인표체
目的在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中进行表达,用亲和层析柱纯化表达产物, 并用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.结果 (1)在我们比较的1 249 个碱基中,我们得到的ROP1基因在Ossorio报道的基因的447位与448 位之间有一96bp的插入片段,另有14个碱基不同,造成3个氨基酸的改变,两基因之间有91.19%的同源性,(2)得到一分子量约为70kDa的融合蛋白.结论 1,我们获得了一与Ossorio报道的基因有较大差异的rop1基因(GeneBank登录号:AF350261) (2),ROP1基因在大肠杆菌中得到了R OP1融合蛋白的高效表达.
目的在大腸桿菌中高效錶達ROP1抗原.方法採用聚閤酶鏈反應(PCR)從弓形蟲RH株cDNA文庫中擴增得到編碼ROP1的基因,經DNA序列分析後導入錶達載體pGEX-5x-3,然後在大腸桿菌BL21中進行錶達,用親和層析柱純化錶達產物, 併用SDS-PAGE和Western blotting進行鑒定.結果 (1)在我們比較的1 249 箇堿基中,我們得到的ROP1基因在Ossorio報道的基因的447位與448 位之間有一96bp的插入片段,另有14箇堿基不同,造成3箇氨基痠的改變,兩基因之間有91.19%的同源性,(2)得到一分子量約為70kDa的融閤蛋白.結論 1,我們穫得瞭一與Ossorio報道的基因有較大差異的rop1基因(GeneBank登錄號:AF350261) (2),ROP1基因在大腸桿菌中得到瞭R OP1融閤蛋白的高效錶達.
목적재대장간균중고효표체ROP1항원.방법채용취합매련반응(PCR)종궁형충RH주cDNA문고중확증득도편마ROP1적기인,경DNA서렬분석후도입표체재체pGEX-5x-3,연후재대장간균BL21중진행표체,용친화층석주순화표체산물, 병용SDS-PAGE화Western blotting진행감정.결과 (1)재아문비교적1 249 개감기중,아문득도적ROP1기인재Ossorio보도적기인적447위여448 위지간유일96bp적삽입편단,령유14개감기불동,조성3개안기산적개변,량기인지간유91.19%적동원성,(2)득도일분자량약위70kDa적융합단백.결론 1,아문획득료일여Ossorio보도적기인유교대차이적rop1기인(GeneBank등록호:AF350261) (2),ROP1기인재대장간균중득도료R OP1융합단백적고효표체.
