中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
2期
173-177
,共5页
黄鹤%杨晟%李仁宝%黄晓冬%袁中一
黃鶴%楊晟%李仁寶%黃曉鼕%袁中一
황학%양성%리인보%황효동%원중일
青霉素G酰化酶%巨大芽孢杆菌%枯草芽孢杆菌%基因表达%条件优化
青黴素G酰化酶%巨大芽孢桿菌%枯草芽孢桿菌%基因錶達%條件優化
청매소G선화매%거대아포간균%고초아포간균%기인표체%조건우화
为获得巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶(PGA)的高产菌株和条件,构建了分泌表达PGA的基因工程枯草杆菌菌株,对表达条件进行了优化.以LB作为初始培养基,考察了温度、苯乙酸、装液量、碳源对于工程菌PGA产量的影响.实验发现重组细胞产酶不再需要变温和苯乙酸诱导.充足的通气量和适当浓度的淀粉可使细胞密度及PGA表达量大为提高.表达条件优化后,菌体A600由3提高到20,PGA的表达量由3~6 U/ml提高到35~40 U/ml,为目前生产用巨大芽孢杆菌表达量的6倍.
為穫得巨大芽孢桿菌青黴素G酰化酶(PGA)的高產菌株和條件,構建瞭分泌錶達PGA的基因工程枯草桿菌菌株,對錶達條件進行瞭優化.以LB作為初始培養基,攷察瞭溫度、苯乙痠、裝液量、碳源對于工程菌PGA產量的影響.實驗髮現重組細胞產酶不再需要變溫和苯乙痠誘導.充足的通氣量和適噹濃度的澱粉可使細胞密度及PGA錶達量大為提高.錶達條件優化後,菌體A600由3提高到20,PGA的錶達量由3~6 U/ml提高到35~40 U/ml,為目前生產用巨大芽孢桿菌錶達量的6倍.
위획득거대아포간균청매소G선화매(PGA)적고산균주화조건,구건료분비표체PGA적기인공정고초간균균주,대표체조건진행료우화.이LB작위초시배양기,고찰료온도、분을산、장액량、탄원대우공정균PGA산량적영향.실험발현중조세포산매불재수요변온화분을산유도.충족적통기량화괄당농도적정분가사세포밀도급PGA표체량대위제고.표체조건우화후,균체A600유3제고도20,PGA적표체량유3~6 U/ml제고도35~40 U/ml,위목전생산용거대아포간균표체량적6배.