中国热带医学
中國熱帶醫學
중국열대의학
CHINA TROPICAL MEDICINE
2001年
1期
3-5
,共3页
蔡贤铮%区采莹%王香凤%华德%陈历昌
蔡賢錚%區採瑩%王香鳳%華德%陳歷昌
채현쟁%구채형%왕향봉%화덕%진력창
双重聚合酶链反应%恶性疟原虫%间日疟原虫%基因检测
雙重聚閤酶鏈反應%噁性瘧原蟲%間日瘧原蟲%基因檢測
쌍중취합매련반응%악성학원충%간일학원충%기인검측
目的建立一种适合于我国恶性疟、间日疟和两者混合感染地区,一次性检测人体内或蚊体内的恶性疟原虫(P.f.)和间日疟原虫(P.v.)的双重聚合酶链反应(PCR)法.方法根据疟原虫红内期SSUrRNA基因特定片段,设计合成3条寡核苷酸特异引物,在一个反应体系中,同时检测P.f.与P.v.的双重PCR技术,操作方法按PCR常规.结果从P.f.和P.v.感染血样中,分别扩增出274bp和412bp的特异片段,检出水平达1～5个虫/μl血,而人基因组DNA、约氏疟原虫、伯氏疟原虫均未见扩增条带;但食蟹猴疟原虫(P.c.)与P.v.相似,在412bp可见扩增条带.经对采自不同疟区发热待查病人的滤纸干血滴和确诊疟疾病人的静脉血检测,344例血样中,检出阴性112例、P.f.109例、P.v.114例、P.f.+P.v.9例,阳性率67.4%;比常规镜检的阳性率66.3%稍高,尤以检出P.f.+P.v.感染病例高.分别检测人工感染P.f.与P.v.各10只大劣按蚊的阳性唾腺,均被检出同种的阳性结果.结论一次性检测P.f.DNA与P.v.DNA的双重PCR法,敏感性高,特异性强,稳定性好,具有简化操作、提高工效、降低耗费的优点.对发热待查病人诊断和蚊媒感染疟原虫调查,以及疟疾病原学的检测质控方面,均有实用价值.
目的建立一種適閤于我國噁性瘧、間日瘧和兩者混閤感染地區,一次性檢測人體內或蚊體內的噁性瘧原蟲(P.f.)和間日瘧原蟲(P.v.)的雙重聚閤酶鏈反應(PCR)法.方法根據瘧原蟲紅內期SSUrRNA基因特定片段,設計閤成3條寡覈苷痠特異引物,在一箇反應體繫中,同時檢測P.f.與P.v.的雙重PCR技術,操作方法按PCR常規.結果從P.f.和P.v.感染血樣中,分彆擴增齣274bp和412bp的特異片段,檢齣水平達1～5箇蟲/μl血,而人基因組DNA、約氏瘧原蟲、伯氏瘧原蟲均未見擴增條帶;但食蟹猴瘧原蟲(P.c.)與P.v.相似,在412bp可見擴增條帶.經對採自不同瘧區髮熱待查病人的濾紙榦血滴和確診瘧疾病人的靜脈血檢測,344例血樣中,檢齣陰性112例、P.f.109例、P.v.114例、P.f.+P.v.9例,暘性率67.4%;比常規鏡檢的暘性率66.3%稍高,尤以檢齣P.f.+P.v.感染病例高.分彆檢測人工感染P.f.與P.v.各10隻大劣按蚊的暘性唾腺,均被檢齣同種的暘性結果.結論一次性檢測P.f.DNA與P.v.DNA的雙重PCR法,敏感性高,特異性彊,穩定性好,具有簡化操作、提高工效、降低耗費的優點.對髮熱待查病人診斷和蚊媒感染瘧原蟲調查,以及瘧疾病原學的檢測質控方麵,均有實用價值.
목적건립일충괄합우아국악성학、간일학화량자혼합감염지구,일차성검측인체내혹문체내적악성학원충(P.f.)화간일학원충(P.v.)적쌍중취합매련반응(PCR)법.방법근거학원충홍내기SSUrRNA기인특정편단,설계합성3조과핵감산특이인물,재일개반응체계중,동시검측P.f.여P.v.적쌍중PCR기술,조작방법안PCR상규.결과종P.f.화P.v.감염혈양중,분별확증출274bp화412bp적특이편단,검출수평체1～5개충/μl혈,이인기인조DNA、약씨학원충、백씨학원충균미견확증조대;단식해후학원충(P.c.)여P.v.상사,재412bp가견확증조대.경대채자불동학구발열대사병인적려지간혈적화학진학질병인적정맥혈검측,344례혈양중,검출음성112례、P.f.109례、P.v.114례、P.f.+P.v.9례,양성솔67.4%;비상규경검적양성솔66.3%초고,우이검출P.f.+P.v.감염병례고.분별검측인공감염P.f.여P.v.각10지대렬안문적양성타선,균피검출동충적양성결과.결론일차성검측P.f.DNA여P.v.DNA적쌍중PCR법,민감성고,특이성강,은정성호,구유간화조작、제고공효、강저모비적우점.대발열대사병인진단화문매감염학원충조사,이급학질병원학적검측질공방면,균유실용개치.
