CAJ | 학술논문

借鉴互联网中已经克隆到的Activin基因βA亚基成熟肽序列，设计并合成1对兼并引物，利用PCR技术从大熊猫、小熊猫、马来熊的基因组DNA中直接扩增目的基因片段，并分别克隆到大肠杆菌载体pBlueScript+当中，然后对培养产物进行序列测定。DNA序列分析表明，三种物种的Activin基因βA亚基成熟肽序列长度均为359bp，无内含子。基因片段编码一个含有119个氨基酸残基的肽段。大熊猫、小熊猫、马来熊在该成熟肽核苷酸和氨基酸序列上表现出高度的同源性，其中核苷酸同源性为93.9髎，氨基酸同源性高达99髎以上。此外，3种动物的核酸限制性酶切图谱也高度相似。与GenBank中收录的其他物种Activin基因βA亚基成熟肽序列相比较，显示此片段在处于不同进化程度的物种之间仍具有高度保守性。运用系统发育与进化树软件包PHILIP，并结合克隆序列对大熊猫、小熊猫、马来熊进化与分类地位进行了探讨。采用不同的统计学分析方法，所得到的3个物种系统发育进化树的拓扑结构完全一致。相比较而言，大熊猫与马来熊有着较近的亲缘关系，而小熊猫与上述两个物种的亲缘关系相对疏远。结果支持将大熊猫与马来熊归为熊科、而将小熊猫单列成科的学术观点。这是首次以生殖相关的核基因作为研究对象，为大熊猫及其近种进行系统分类研究所提供的又一分子生物学证据。
차감호련망중이경극륭도적Activin기인βA아기성숙태서렬，설계병합성1대겸병인물，이용PCR기술종대웅묘、소웅묘、마래웅적기인조DNA중직접확증목적기인편단，병분별극륭도대장간균재체pBlueScript+당중，연후대배양산물진행서렬측정。DNA서렬분석표명，삼충물충적Activin기인βA아기성숙태서렬장도균위359bp，무내함자。기인편단편마일개함유119개안기산잔기적태단。대웅묘、소웅묘、마래웅재해성숙태핵감산화안기산서렬상표현출고도적동원성，기중핵감산동원성위93.9료，안기산동원성고체99료이상。차외，3충동물적핵산한제성매절도보야고도상사。여GenBank중수록적기타물충Activin기인βA아기성숙태서렬상비교，현시차편단재처우불동진화정도적물충지간잉구유고도보수성。운용계통발육여진화수연건포PHILIP，병결합극륭서렬대대웅묘、소웅묘、마래웅진화여분류지위진행료탐토。채용불동적통계학분석방법，소득도적3개물충계통발육진화수적탁복결구완전일치。상비교이언，대웅묘여마래웅유착교근적친연관계，이소웅묘여상술량개물충적친연관계상대소원。결과지지장대웅묘여마래웅귀위웅과、이장소웅묘단렬성과적학술관점。저시수차이생식상관적핵기인작위연구대상，위대웅묘급기근충진행계통분류연구소제공적우일분자생물학증거。