中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2002年
5期
392-398
,共7页
张晓宁%林长发%陈火英%王昊%曲志才%张宏伟%姚剑虹%沈大棱
張曉寧%林長髮%陳火英%王昊%麯誌纔%張宏偉%姚劍虹%瀋大稜
장효저%림장발%진화영%왕호%곡지재%장굉위%요검홍%침대릉
盐藻 NaCl诱导 差异表达 叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶 耐盐性
鹽藻 NaCl誘導 差異錶達 葉綠體果糖-1,6-二燐痠醛縮酶 耐鹽性
염조 NaCl유도 차이표체 협록체과당-1,6-이린산철축매 내염성
采用快速扩增cDNA末端(RACE)技术, 获得了盐藻(Dunaliella salina)受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长cDNA (DsALDP). 蛋白质序列分析发现, DsALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(AldP)具有较高的同源性(66%~73%). 系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近. 就表达谱而言, DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本, 其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化. 筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草, 对4个T1代转基因植株进行Southern检测, 证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组. RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达. 生物测试表明, T1-1, T1-2和T1-3植株在100~200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性, 且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.
採用快速擴增cDNA末耑(RACE)技術, 穫得瞭鹽藻(Dunaliella salina)受誘導錶達的果糖-1,6-二燐痠醛縮酶全長cDNA (DsALDP). 蛋白質序列分析髮現, DsALDP與許多植物葉綠體的果糖-1,6-二燐痠醛縮酶(AldP)具有較高的同源性(66%~73%). 繫統進化分析進一步證明DsALDP與藻類的AldP親緣關繫最近. 就錶達譜而言, DsALDP是NaCl誘導下新錶達的轉錄本, 其錶達水平隨誘導時間的不同而呈顯著變化. 篩選的DsALDP cDNA構建到雙元載體pBI121併導入農桿菌用以轉化煙草, 對4箇T1代轉基因植株進行Southern檢測, 證明DsALDP已整閤入轉基因植株的基因組. RT-PCR分析顯示DsALDP在這些植株中均得到有效錶達. 生物測試錶明, T1-1, T1-2和T1-3植株在100~200 mmol/L NaCl下仍保持醛縮酶活性, 且其脯氨痠含量均有不同程度的升高.
채용쾌속확증cDNA말단(RACE)기술, 획득료염조(Dunaliella salina)수유도표체적과당-1,6-이린산철축매전장cDNA (DsALDP). 단백질서렬분석발현, DsALDP여허다식물협록체적과당-1,6-이린산철축매(AldP)구유교고적동원성(66%~73%). 계통진화분석진일보증명DsALDP여조류적AldP친연관계최근. 취표체보이언, DsALDP시NaCl유도하신표체적전록본, 기표체수평수유도시간적불동이정현저변화. 사선적DsALDP cDNA구건도쌍원재체pBI121병도입농간균용이전화연초, 대4개T1대전기인식주진행Southern검측, 증명DsALDP이정합입전기인식주적기인조. RT-PCR분석현시DsALDP재저사식주중균득도유효표체. 생물측시표명, T1-1, T1-2화T1-3식주재100~200 mmol/L NaCl하잉보지철축매활성, 차기포안산함량균유불동정도적승고.
