中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2007年
1期
54-58
,共5页
狂犬病病毒%糖蛋白%重组腺病毒
狂犬病病毒%糖蛋白%重組腺病毒
광견병병독%당단백%중조선병독
利用大肠杆菌内质粒间同源重组的方法,将狂犬病病毒G基因插入腺病毒基因组的E1基因区,构建了带有狂犬病病毒G基因的重组腺病毒质粒.重组质粒经Pme Ⅰ酶切,线性化后转染293细胞,成功获得了均一的复制缺陷型重组腺病毒.荧光显微镜下能观察到重组腺病毒GFP报告基因的表达.用PCR方法证实了重组腺病毒基因组中含有G基因,RT-PCR方法可检测到G基因的转录产物mRNA,Western blotting方法能检测到重组腺病毒在293细胞中表达的G蛋白.此重组腺病毒在293细胞连续传代10次,PCR方法都能扩增出G基因目的条带.试验结果表明,狂犬病病毒G基因已成功重组到腺病毒基因组中,不但能稳定表达,而且能在重组腺病毒基因组中稳定存在.
利用大腸桿菌內質粒間同源重組的方法,將狂犬病病毒G基因插入腺病毒基因組的E1基因區,構建瞭帶有狂犬病病毒G基因的重組腺病毒質粒.重組質粒經Pme Ⅰ酶切,線性化後轉染293細胞,成功穫得瞭均一的複製缺陷型重組腺病毒.熒光顯微鏡下能觀察到重組腺病毒GFP報告基因的錶達.用PCR方法證實瞭重組腺病毒基因組中含有G基因,RT-PCR方法可檢測到G基因的轉錄產物mRNA,Western blotting方法能檢測到重組腺病毒在293細胞中錶達的G蛋白.此重組腺病毒在293細胞連續傳代10次,PCR方法都能擴增齣G基因目的條帶.試驗結果錶明,狂犬病病毒G基因已成功重組到腺病毒基因組中,不但能穩定錶達,而且能在重組腺病毒基因組中穩定存在.
이용대장간균내질립간동원중조적방법,장광견병병독G기인삽입선병독기인조적E1기인구,구건료대유광견병병독G기인적중조선병독질립.중조질립경Pme Ⅰ매절,선성화후전염293세포,성공획득료균일적복제결함형중조선병독.형광현미경하능관찰도중조선병독GFP보고기인적표체.용PCR방법증실료중조선병독기인조중함유G기인,RT-PCR방법가검측도G기인적전록산물mRNA,Western blotting방법능검측도중조선병독재293세포중표체적G단백.차중조선병독재293세포련속전대10차,PCR방법도능확증출G기인목적조대.시험결과표명,광견병병독G기인이성공중조도선병독기인조중,불단능은정표체,이차능재중조선병독기인조중은정존재.
