生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
218-222
,共5页
王臻%颜江华%王阶平%谢莲英%吴娜
王臻%顏江華%王階平%謝蓮英%吳娜
왕진%안강화%왕계평%사련영%오나
截短组织因子%链霉亲和素%融合蛋白%血管栓塞
截短組織因子%鏈黴親和素%融閤蛋白%血管栓塞
절단조직인자%련매친화소%융합단백%혈관전새
制备凝血靶向通用效应因子tTF/SA融合蛋白,并鉴定其生物学活性.利用PCR技术构建tTF与链霉亲和素SA的融合基因,克隆至表达载体pET22 b(+),在E.coli BL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱纯化tTF/SA融合蛋白.凝血实验和FX活化实验鉴定融合蛋白中tTF的活性,ELISA鉴定融合蛋白中SA与生物素Biotin结合的活性.获得序列正确的tTF/SA/pET22 b(+)重组子,融合基因在E.coli BL21(DE3)中高效表达.纯化后的融合蛋白具有活化FX、引起血液凝固的能力,且能与生物素结合.融合基因已成功在E.coli BL21(DE3)中表达,tTF/SA融合蛋白具有TF和SA活性.融合蛋白tTF/SA可作为通用效应因子,与生物素化的肿瘤组织血管特异性载体联用,实现选择性诱发肿瘤组织血管栓塞的多点治疗.
製備凝血靶嚮通用效應因子tTF/SA融閤蛋白,併鑒定其生物學活性.利用PCR技術構建tTF與鏈黴親和素SA的融閤基因,剋隆至錶達載體pET22 b(+),在E.coli BL21(DE3)中錶達,鎳親和層析柱純化tTF/SA融閤蛋白.凝血實驗和FX活化實驗鑒定融閤蛋白中tTF的活性,ELISA鑒定融閤蛋白中SA與生物素Biotin結閤的活性.穫得序列正確的tTF/SA/pET22 b(+)重組子,融閤基因在E.coli BL21(DE3)中高效錶達.純化後的融閤蛋白具有活化FX、引起血液凝固的能力,且能與生物素結閤.融閤基因已成功在E.coli BL21(DE3)中錶達,tTF/SA融閤蛋白具有TF和SA活性.融閤蛋白tTF/SA可作為通用效應因子,與生物素化的腫瘤組織血管特異性載體聯用,實現選擇性誘髮腫瘤組織血管栓塞的多點治療.
제비응혈파향통용효응인자tTF/SA융합단백,병감정기생물학활성.이용PCR기술구건tTF여련매친화소SA적융합기인,극륭지표체재체pET22 b(+),재E.coli BL21(DE3)중표체,얼친화층석주순화tTF/SA융합단백.응혈실험화FX활화실험감정융합단백중tTF적활성,ELISA감정융합단백중SA여생물소Biotin결합적활성.획득서렬정학적tTF/SA/pET22 b(+)중조자,융합기인재E.coli BL21(DE3)중고효표체.순화후적융합단백구유활화FX、인기혈액응고적능력,차능여생물소결합.융합기인이성공재E.coli BL21(DE3)중표체,tTF/SA융합단백구유TF화SA활성.융합단백tTF/SA가작위통용효응인자,여생물소화적종류조직혈관특이성재체련용,실현선택성유발종류조직혈관전새적다점치료.
