中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
2期
133-135
,共3页
张艳%赵大鹏%戚凤春%汪春义%张雪梅%范洪学%王坤
張豔%趙大鵬%慼鳳春%汪春義%張雪梅%範洪學%王坤
장염%조대붕%척봉춘%왕춘의%장설매%범홍학%왕곤
甲型流感病毒%HA基因%核酸疫苗%表达载体
甲型流感病毒%HA基因%覈痠疫苗%錶達載體
갑형류감병독%HA기인%핵산역묘%표체재체
目的 构建含有甲型流感病毒HA基因的核酸疫苗表达载体,转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达.方法 将甲型流感病毒New Caledonia/20/99(H1N1)接种鸡胚后,收获尿囊液,提取流感病毒总RNA,RT-PCR法扩增HA基因.经亚克隆后获得质粒pMD-T/HA,酶切鉴定后测序,将其与质粒pVAX1分别双酶切后连接,构建甲型流感病毒表达载体pVAHA.脂质体法转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达.结果 扩增出1700 bp片段,与预期的HA基因大小相符,测序结果与GenBank报道一致,酶切鉴定表明甲型流感病毒表达载体pVAHA构建正确,Western blot检测证明了流感病毒HA蛋白的表达.结论 已成功构建了甲型流感病毒HA基因核酸疫苗表达载体pVAHA .
目的 構建含有甲型流感病毒HA基因的覈痠疫苗錶達載體,轉染COS-7細胞,併檢測目的蛋白的錶達.方法 將甲型流感病毒New Caledonia/20/99(H1N1)接種鷄胚後,收穫尿囊液,提取流感病毒總RNA,RT-PCR法擴增HA基因.經亞剋隆後穫得質粒pMD-T/HA,酶切鑒定後測序,將其與質粒pVAX1分彆雙酶切後連接,構建甲型流感病毒錶達載體pVAHA.脂質體法轉染COS-7細胞,併檢測目的蛋白的錶達.結果 擴增齣1700 bp片段,與預期的HA基因大小相符,測序結果與GenBank報道一緻,酶切鑒定錶明甲型流感病毒錶達載體pVAHA構建正確,Western blot檢測證明瞭流感病毒HA蛋白的錶達.結論 已成功構建瞭甲型流感病毒HA基因覈痠疫苗錶達載體pVAHA .
목적 구건함유갑형류감병독HA기인적핵산역묘표체재체,전염COS-7세포,병검측목적단백적표체.방법 장갑형류감병독New Caledonia/20/99(H1N1)접충계배후,수획뇨낭액,제취류감병독총RNA,RT-PCR법확증HA기인.경아극륭후획득질립pMD-T/HA,매절감정후측서,장기여질립pVAX1분별쌍매절후련접,구건갑형류감병독표체재체pVAHA.지질체법전염COS-7세포,병검측목적단백적표체.결과 확증출1700 bp편단,여예기적HA기인대소상부,측서결과여GenBank보도일치,매절감정표명갑형류감병독표체재체pVAHA구건정학,Western blot검측증명료류감병독HA단백적표체.결론 이성공구건료갑형류감병독HA기인핵산역묘표체재체pVAHA .
